植物吸收的磷主要是H2PO4-的形態(tài)，因此土壤中速效磷含量是評價土壤對作物磷供應(yīng)能力的一種手段，對于施肥有著直接的指導(dǎo)意義。用弱堿法提取堿溶性磷和吸附態(tài)磷，鉬藍與磷酸根生成880nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測定880nm光吸收，即可計算磷含量。

一、正式實驗：

1、若預(yù)實驗測定吸光值超出標(biāo)準(zhǔn)吸光值線性范圍：高于最高值建議將樣本適當(dāng)稀釋后再進行測定，低于低值建議適當(dāng)增加樣本質(zhì)量W后再進行測定，并將改變后的W和D代入公式計算；

2、確定好最適實驗條件后，正式實驗樣本制備同預(yù)實驗樣本制備；

3、正式實驗按照預(yù)實驗上機操作步驟進行（標(biāo)準(zhǔn)管和空白管預(yù)實驗已做，正式實驗可選做）。

二、結(jié)果計算：

1、以各個標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸，其對應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程得到x（μg/mL）。

2、按樣本質(zhì)量計算：

土壤速效磷含量(μg/g土樣)=x×V1÷（W×V1÷V）×D=x÷W×D

V1：加入樣本體積，0.04mL； V：加入提取液體積，1mL；

W：樣本質(zhì)量，g； D：稀釋倍數(shù)，未稀釋即為1。

三、注意事項：

1、工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，正常顏色為淺黃色，如有變色或變藍則均為失效。

2、此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管或EP管等試驗器材均要求嚴格無磷。

3、顯色結(jié)束后應(yīng)立即檢測。

4、用96孔板檢測時，注意板孔中的液體有無氣泡，如有氣泡應(yīng)排除氣泡后再測定OD值。