IHC出現(xiàn)假陽(yáng)性、假陰性等問(wèn)題該怎么辦?
?免疫組化(IHC)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性了怎么辦呢?
一、假陽(yáng)性的處理
1. ?降低一抗?jié)舛?/span>?:通過(guò)降低一抗的濃度,可以減少非特異性結(jié)合,從而降低假陽(yáng)性。通常,降低濃度至能看到陽(yáng)性表達(dá)且能明顯區(qū)分陽(yáng)性區(qū)域與周?chē)g質(zhì)即可?。
2. ?調(diào)整封閉條件?:逐步提高封閉條件,從山羊血清到5%BSA+山羊血清,最終至5%脫脂奶。通常調(diào)整至5%BSA+山羊血清即可,不建議輕易使用5%脫脂奶?。
3. ?選擇合適的二抗?:對(duì)于動(dòng)物標(biāo)本,選擇抗鼠或抗兔的二抗,避免使用通用型二抗,以免種屬間抗原抗體反應(yīng)引起假陽(yáng)性?。
二、假陰性的處理
?抗原修復(fù)?:通過(guò)抗原修復(fù)技術(shù)可以增加抗原的暴露,從而提高檢測(cè)的靈敏度,減少假陰性?。
三、實(shí)驗(yàn)操作中的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法
1. ?個(gè)體差異?:個(gè)體差異可能導(dǎo)致某些人的體內(nèi)存在與抗體相似的物質(zhì),從而導(dǎo)致假陽(yáng)性。通過(guò)多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)和嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件可以減少這種影響?。
2. ?實(shí)驗(yàn)操作誤差?:樣本污染、操作不規(guī)范等可能導(dǎo)致假陽(yáng)性。嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程,確保樣本的純凈和操作的準(zhǔn)確性可以有效減少這種誤差?。
3. ?試劑質(zhì)量?:試劑的質(zhì)量不穩(wěn)定或過(guò)期也可能影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性。使用高質(zhì)量、在有效期內(nèi)的試劑,并嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作可以減少這種影響?。
通過(guò)以上方法,可以有效減少免疫組化實(shí)驗(yàn)中的假陽(yáng)性和假陰性問(wèn)題,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
伊萊瑞特Elabscience有多款IHC試劑盒,如感興趣,請(qǐng)聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司。Elabscience代理
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。