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美國 Zeta life-Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑 2025 年全新升級 產(chǎn)品概述

來源:上海徠同生物科技有限公司   2025年02月24日 10:08  

美國 Zeta life-Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑 2025 年全新升級

產(chǎn)品概述

 

Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑,產(chǎn)品貨號為 AD300025,以下是其詳細的操作說明書。

一、試劑盒組分



  1. Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑:貨號 AD30,是實現(xiàn)高效 RNA 轉(zhuǎn)染的關(guān)鍵成分。

  2. 稀釋液:貨號 X-DS,用于稀釋轉(zhuǎn)染試劑,以確保其在轉(zhuǎn)染過程中發(fā)揮最佳性能。

二、注意事項



  1. 培養(yǎng)基使用:轉(zhuǎn)染復合物可直接轉(zhuǎn)入含有血清的培養(yǎng)基中進行轉(zhuǎn)染操作。轉(zhuǎn)染 24 小時后需更換培養(yǎng)基,48 小時后收集細胞用于后續(xù)實驗。特別注意,轉(zhuǎn)染所用的含血清培養(yǎng)基中不應含有雙抗,以免影響轉(zhuǎn)染效果。

  2. siRNA 純度:使用高純度的 siRNA 對提高轉(zhuǎn)染效率至關(guān)重要。高純度的 siRNA 能夠減少雜質(zhì)干擾,確保轉(zhuǎn)染過程順利進行。

  3. 試劑用量:建議轉(zhuǎn)染試劑的用量為 0.1      μL/pmol siRNA,以達到理想的轉(zhuǎn)染效果。

  4. siRNA 濃度siRNA 的實驗濃度推薦為 40 nM,在此濃度下能夠有效實現(xiàn)基因沉默等實驗目的。

  5. 儲存條件:本產(chǎn)品應儲存于 4°C 環(huán)境中,嚴禁凍融,以保證其活性和穩(wěn)定性。產(chǎn)品的有效期為 1 年,請在有效期內(nèi)使用。

三、簡易操作說明



  1. 核酸準備要求:實驗中使用的 RNA 濃度需達到 20 uM /L,確保 RNA 質(zhì)量和濃度符合實驗要求。

  2. 操作流程

    • 細胞接種:提前 1 天進行細胞接種,確保在轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度達到 70-90%,為轉(zhuǎn)染提供良好的細胞狀態(tài)。

    • 稀釋轉(zhuǎn)染試劑:根據(jù)參考用量,使用稀釋液(貨號       X-DS)對 Advanced RNA® 轉(zhuǎn)染試劑進行稀釋,確保轉(zhuǎn)染試劑的濃度合適。

    • 加入 siRNA 溶液:向稀釋后的轉(zhuǎn)染試劑中加入 siRNA 溶液,并充分混勻,使轉(zhuǎn)染試劑與 siRNA 充分結(jié)合。

    • 孵育形成復合物:將 siRNA 與轉(zhuǎn)染試劑的混合液在室溫下孵育 20-30 分鐘,形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染復合物。若希望達到更佳的轉(zhuǎn)染效果,也可在 37℃下進行孵育。

    • 加入復合物到細胞中:根據(jù)參考用量,將孵育好的復合物加入到細胞中,確保復合物能夠有效進入細胞。

    • 結(jié)果分析:細胞繼續(xù)培養(yǎng) 2-3 天后,對轉(zhuǎn)染效果進行檢測和分析,評估轉(zhuǎn)染的效率和效果。

四、以細胞培養(yǎng)板為例的轉(zhuǎn)染試劑及 RNA 用量梯度說明

 

培養(yǎng)器皿

siRNA 濃度

每孔體積

轉(zhuǎn)染試劑

轉(zhuǎn)染試劑稀釋液

20μM siRNA

培養(yǎng)基

96-well

100 nM

100 μL

1 μL

10 μL

0.5 μL

88.5 μL

96-well

40 nM

100 μL

0.4 μL

10 μL

0.2 μL

89.4 μL

96-well

20 nM

100 μL

0.2 μL

10 μL

0.1 μL

89.7 μL

96-well

10 nM

100 μL

0.1 μL

10 μL

0.05 μL

89.85 μL

24-well

100 nM

500 μL

5 μL

50 μL

2.5 μL

442.5 μL

24-well

40 nM

500 μL

2 μL

50 μL

1 μL

447 μL

24-well

20 nM

500 μL

1 μL

50 μL

0.5 μL

448.5 μL

24-well

10 nM

500 μL

0.5 μL

50 μL

0.25 μL

449.25 μL

12-well

100 nM

1 mL

10 μL

100 μL

5 μL

885 μL

12-well

40 nM

1 mL

4 μL

100 μL

2 μL

894 μL

12-well

20 nM

1 mL

2 μL

100 μL

1 μL

897 μL

12-well

10 nM

1 mL

1 μL

100 μL

0.5 μL

898.5 μL

6-well

100 nM

2 mL

20 μL

200 μL

10 μL

1770 μL

6-well

40 nM

2 mL

8 μL

200 μL

4 μL

1788 μL

6-well

20 nM

2 mL

4 μL

200 μL

2 μL

1794 μL

6-well

10 nM

2 mL

2 μL

200 μL

1 μL

1797 μL

 

本產(chǎn)品僅用于科研用途,嚴禁用于臨床診斷或治療等其他用途。

 


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