3D培養(yǎng)中的常見(jiàn)疑問(wèn):ibidi惰性底部解決方案盤(pán)點(diǎn)
ibidi的Bioinert Surface生物惰性表面有什么神奇之處?
Bioinert表面非常適合培養(yǎng)懸浮細(xì)胞和細(xì)胞聚集體。
Bioinert表面不會(huì)吸附、涂層或結(jié)合蛋白質(zhì)、抗體、酶和其他生物分子。因此,Bioinert生物惰性技術(shù)可在基于細(xì)胞的檢測(cè)中提供數(shù)天甚至數(shù)周的穩(wěn)定鈍化。特殊親水性(水凝膠層的特性)的Bioinert生物惰性表面可阻止任何蛋白質(zhì)附著,從而抑制細(xì)胞的后續(xù)附著。Bioinert表面不能被細(xì)胞生物降解,因此可以對(duì)懸浮細(xì)胞和細(xì)胞聚集體進(jìn)行長(zhǎng)期檢測(cè)。與ibiTreat和Uncoated表面不同的是,Bioinert表面不能進(jìn)行涂層處理。
ibidi都有哪些具有Bioinert ULA(Ultra-Low Attachment)表面的產(chǎn)品?
ibidi有多種不同幾何形狀的Bioinert表面的產(chǎn)品,有Dish(35mm的培養(yǎng)皿)、µ-Slides(4孔和8孔腔室載玻片、六通道載玻片)和µ-Slide Spheroid Perfusion(球體灌注通道培養(yǎng)載玻片), 科研人員可根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的Bioinert產(chǎn)品。
1.能否將µ-Dish 35 mm, high Bioinert高壁生物惰性表面培養(yǎng)皿與插件或微孔插件結(jié)合使用?
原則上,這種組合可用于創(chuàng)建一個(gè)較小孔徑的Bioinert表面。不過(guò),由于硅膠插件的側(cè)壁沒(méi)有經(jīng)過(guò)鈍化處理,細(xì)胞有可能會(huì)吸附在該區(qū)域。
2.我想要在無(wú)粘性的Bioinert生物惰性表面上培養(yǎng)球體并對(duì)其成像幾天。如何在不吸出球體的情況下交換培養(yǎng)基?
在µ-Dish 35 mm, high Bioinert高壁生物惰性表面培養(yǎng)皿中,可以輕松實(shí)現(xiàn)基于漩渦的培養(yǎng)基交換。
3.如何儲(chǔ)存ibidi Bioinert產(chǎn)品?
ibidi Bioinert產(chǎn)品應(yīng)儲(chǔ)存在室溫、干燥的地方,避免陽(yáng)光直射。
4.ibidi Bioinert表面的有效期有多長(zhǎng)?
µ-Slides, µ-Dishes and µ-Plates都經(jīng)過(guò)滅菌處理并密封保存。產(chǎn)品有效期為36個(gè)月。
5.單細(xì)胞和球狀體不會(huì)粘附著在Bioinert上。這是否意味著球狀體在成像過(guò)程中會(huì)游離表面?如果是,如何避免?
即使沒(méi)有細(xì)胞附著,球狀體或細(xì)胞簇也以穩(wěn)定的方式定位在生物神經(jīng)表面。當(dāng)不存在強(qiáng)對(duì)流、蒸發(fā)或快速階段加速等干擾效應(yīng)時(shí),就不需要在Bioinert上穩(wěn)定您的細(xì)胞樣本。但是,如果需要固定樣本,建議增加培養(yǎng)基的粘度(如使用低熔點(diǎn)瓊脂糖)。
6.標(biāo)準(zhǔn)超低吸附培養(yǎng)皿(ULA)不適用于熒光顯微鏡或高分辨率成像。ibidi µ-Dish 35 mm, high Bioinert高壁生物惰性表面的培養(yǎng)皿是否適合這些應(yīng)用?
適合。超薄的Bioinert表面支持所有類(lèi)型的高分辨率和熒光顯微鏡技術(shù),即使在油浸的情況下也是如此。Bioinert(一種薄薄的200 nm的親水性多元醇水凝膠)穩(wěn)定共價(jià)結(jié)合到ibidi Polymer Coverslip聚合物蓋玻片上,該蓋玻片專(zhuān)為高分辨率顯微鏡應(yīng)用而優(yōu)化。Bioinert表面本身不會(huì)干擾ibidi聚合物蓋玻片的優(yōu)異光學(xué)性能。透射率、自發(fā)熒光、折射率、阿貝數(shù)和雙折射等光學(xué)指標(biāo)均不會(huì)改變。
ibidi Surfaces Show no Autofluorescence
1.能否從ibidi micropattern微圖案中分離球狀體/類(lèi)器官進(jìn)行分析?
可以。使用移液槍用培養(yǎng)基或PBS沖洗球狀體,就可以將其分離。µ-Pattern越小,就越容易分離。
2.是否可以在µ-Slide 2孔共培養(yǎng)載玻片中使用Matrigel™?
可以。比如,您可以將球體細(xì)胞嵌入凝膠中,然后將其放入µ-Slide 2 Well Co-Culture 2孔共培養(yǎng)載玻片的中心孔中。也可以用Matrigel填充小孔,然后在上面接種細(xì)胞。
3.在Matrigel™檢測(cè)過(guò)程中如何保持細(xì)胞聚焦?
在延時(shí)攝影模式下拍攝圖像時(shí)保持對(duì)焦是一項(xiàng)挑戰(zhàn)。我們測(cè)試了許多方法,但發(fā)現(xiàn)只有自動(dòng)對(duì)焦才有幫助。
4.Bioinert表面的穩(wěn)定性如何?用移液器吸頭接觸Bioinert表面是否會(huì)損壞它?
用移液器吸頭接觸Bioinert表面不會(huì)改變其特性。不過(guò),我們建議您避免機(jī)械地接觸或刮擦表面。
5.Bioinert是基于水凝膠的。會(huì)發(fā)生膨脹嗎?
一旦干燥表面被潤(rùn)濕,就會(huì)發(fā)生膨脹過(guò)程。該過(guò)程是可逆的,不會(huì)改變鈍化和光學(xué)性能。
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