CarpTrans轉(zhuǎn)染試劑廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)沉默研究
CarpTrans轉(zhuǎn)染試劑用于科學(xué)研究、工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床試驗中重組蛋白/抗體的瞬時表達(dá)與AAV/AdV/LV的生產(chǎn),GMP級可用于基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域(CGT)中病毒載體的制備與生產(chǎn)。
適用細(xì)胞:常見細(xì)胞系,如Expi293, ExpiCHO-S, HEK293T等。
特點
* 高效轉(zhuǎn)染: CarpTrans 具有優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率,即使對于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,也能實現(xiàn)高水平的基因表達(dá)或基因沉默。
* 廣譜性: 適用于多種細(xì)胞類型,包括原代細(xì)胞、干細(xì)胞、懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞。
* 低細(xì)胞毒性: 對細(xì)胞的毒性較低,能夠維持細(xì)胞的正常生理功能,提高實驗的可靠性。
* 操作簡便: 操作步驟簡單,易于掌握,無需特殊設(shè)備或復(fù)雜的培養(yǎng)基。
* 血清兼容性: 在含有血清的培養(yǎng)基中也能保持較高的轉(zhuǎn)染效率,無需更換無血清培養(yǎng)基。
CarpTrans轉(zhuǎn)染試劑的作用機制
1. 復(fù)合物形成: CarpTrans 試劑中的陽離子脂質(zhì)體與帶負(fù)電荷的核酸分子(如 DNA、RNA)結(jié)合,形成穩(wěn)定的復(fù)合物。
2. 細(xì)胞結(jié)合: 復(fù)合物通過靜電相互作用與細(xì)胞膜表面的帶負(fù)電荷的分子結(jié)合。
3. 內(nèi)吞作用: 細(xì)胞通過內(nèi)吞作用將復(fù)合物吞入細(xì)胞內(nèi),形成內(nèi)吞體。
4. 內(nèi)吞體逃逸: CarpTrans 試劑能夠破壞內(nèi)吞體的膜結(jié)構(gòu),使核酸分子從內(nèi)吞體中釋放出來,進入細(xì)胞質(zhì)。
5. 核酸轉(zhuǎn)運: DNA 進入細(xì)胞核,進行基因表達(dá);RNA 在細(xì)胞質(zhì)中發(fā)揮作用,如 mRNA 翻譯或 siRNA 介導(dǎo)的基因沉默。
CarpTrans轉(zhuǎn)染試劑的應(yīng)用
* 基因表達(dá)研究: 將含有目的基因的 DNA 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞,研究基因的表達(dá)調(diào)控、蛋白質(zhì)功能等。
* 基因沉默研究: 將 siRNA 或 miRNA 轉(zhuǎn)染入細(xì)胞,沉默特定基因的表達(dá),研究基因的功能。
* 藥物篩選: 將含有藥物靶點的細(xì)胞轉(zhuǎn)染入細(xì)胞,篩選能夠調(diào)控靶點基因表達(dá)的藥物。
* 基因治療: 將治療性基因轉(zhuǎn)染入患者的細(xì)胞,治療遺傳性疾病或獲得性疾病。
* 疫苗研發(fā): 將編碼抗原的 DNA 或 RNA 轉(zhuǎn)染入細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫反應(yīng),研發(fā)新型疫苗。
* 干細(xì)胞研究: 將轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)染入干細(xì)胞,誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為特定類型的細(xì)胞。
使用CarpTrans轉(zhuǎn)染試劑的注意事項
* 細(xì)胞狀態(tài): 確保細(xì)胞處于良好的生長狀態(tài),避免使用傳代次數(shù)過多的細(xì)胞。
* 核酸質(zhì)量: 使用高質(zhì)量的核酸,避免使用降解或污染的核酸。
* 試劑比例: 優(yōu)化 CarpTrans 試劑與核酸的比例,以獲得最佳的轉(zhuǎn)染效率。
* 轉(zhuǎn)染時間: 根據(jù)細(xì)胞類型和實驗?zāi)康?,選擇合適的轉(zhuǎn)染時間。
* 培養(yǎng)條件: 維持細(xì)胞的正常培養(yǎng)條件,避免劇烈的溫度變化或 pH 值波動。
* 毒性評估: 在進行大規(guī)模轉(zhuǎn)染實驗前,先進行小規(guī)模的預(yù)實驗,評估 CarpTrans 試劑對細(xì)胞的毒性。
總結(jié)
CarpTrans 轉(zhuǎn)染試劑是一種高效、廣譜、低毒的轉(zhuǎn)染試劑,廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)研究、基因沉默研究、藥物篩選、基因治療、疫苗研發(fā)和干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。通過優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,可以獲得更高的轉(zhuǎn)染效率和更可靠的實驗結(jié)果。
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