產(chǎn)品名稱:高鐵血紅蛋白(MetHb)測(cè)試盒
一、實(shí)驗(yàn)儀器:試管、微量移液器、旋渦混勻器、可見分光光度計(jì)(540、602和630nm)
二、適用范圍:本試劑盒可測(cè)各種動(dòng)物全血等樣本中高鐵血紅蛋白含量;
三、測(cè)定意義:體內(nèi)一氧化氮彌散入血后,很快與氧合血紅蛋白結(jié)合形成高鐵血紅蛋白(methemoglobin, MetHb),NO與MetHb變化相關(guān),故全血MetHb檢測(cè)近年來受到臨床的廣泛重視。同時(shí)血液中高鐵血紅蛋白含量的測(cè)定對(duì)接觸芳香族氨基、硝基化合物所引起的中毒性疾病的診斷與治療,有重要的意義。
四、試劑組成及配制:
A.試劑一:血紅蛋白測(cè)定濃縮液,1ml X 2支,2—8℃保存。
血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液的配制:臨用前將濃縮液用雙蒸水1:99稀釋,即100倍 稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。配好的試劑2—8℃避光保存,可存放一個(gè)月以上。
B.試劑二: 高鐵血紅蛋白測(cè)定濃縮液,30ml X 1瓶,2—8℃。
高鐵血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液的配制:
濃縮液:雙蒸水=1:9稀釋,即10倍稀釋,可存放6個(gè)月以上。
C.試劑三:制作還原血紅蛋白曲線用
① 白色粉劑 X 1支,2—8 ℃避光保存。
② 稀釋液,1ml X 1支,2—8 ℃保存。
試劑三應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入1ml稀釋液,現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光。
D.試劑四:制作高鐵血紅蛋白曲線用
① 磚紅色粉劑 X 1支,2—8℃避光保存。
② 稀釋液,1ml X 1支,2—8℃保存。
試劑四應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入1ml稀釋液,現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光
五、操作過程:
1、制備抗凝全血:取全血立即加入到肝素抗凝管內(nèi),加蓋封口,輕輕顛倒混勻。
2、血紅蛋白含量的測(cè)定:取 0.01ml 全血與 2.5ml 的 100 倍稀釋的試劑一應(yīng)用液(血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液),混勻,靜置5分鐘后,1cm光徑,雙蒸水調(diào)零,540nm處測(cè)定各管吸光度值。
3、高鐵血紅蛋白測(cè)定: 取0.05ml全血,加入2.5ml的試劑二稀釋應(yīng)用液(即高鐵血紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液),混勻,靜置5分鐘后,1cm光徑,雙蒸水調(diào)零,測(cè)定630nm處及602nm處吸光度值。如果沒有雙波長的分光光度計(jì)則可以先測(cè)定各管630nm處吸光度值,然后再測(cè)各管602 nm處吸光度值。但一定要注意各管的編號(hào)不要弄錯(cuò)。
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