在生物化學(xué)和藥物開發(fā)領(lǐng)域，還原劑的選擇至關(guān)重要。BioVectra的貨號1301產(chǎn)品——cGMP TRIS(2-CARBOXYETHYL) PHOSPHINE, HYDROCHLORIDE（cGMP TCEP-HCl）正是這樣一款高效、可靠的試劑。

產(chǎn)品亮點(diǎn)：

1、高純度與cGMP級品質(zhì)

cGMP TCEP-HCl純度≥99%，符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)，適用于對質(zhì)量要求很高的生物工藝和制藥生產(chǎn)。

2、高效還原能力

作為一款非硫醇還原劑，TCEP-HCl在還原二硫鍵方面表現(xiàn)出色，可在溫和條件下快速完成還原反應(yīng)，且不產(chǎn)生異味。

3、廣泛適用性

適用于抗體藥物偶聯(lián)物（ADCs）的制備、蛋白質(zhì)氧化反應(yīng)以及多種生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，是實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)的理想選擇。

4、多種規(guī)格

提供1g、5g、10g、100g等多種規(guī)格，滿足不同規(guī)模實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)需求。

應(yīng)用場景：

1、抗體藥物開發(fā)：在ADCs制備中，TCEP-HCl可高效還原二硫鍵，確保藥物偶聯(lián)的高效性和穩(wěn)定性。

2、蛋白質(zhì)研究：用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究和功能分析，幫助科學(xué)家更好地理解生物分子的相互作用。

3、生物工藝優(yōu)化：在重組蛋白生產(chǎn)和發(fā)酵過程中，TCEP-HCl可作為關(guān)鍵試劑，提升生產(chǎn)效率。

使用方法和注意事項(xiàng)

1. 溶解與儲存

*溶解：TCEP-HCl（三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽）在水中極易溶解，溶解度可達(dá) 50 mg/mL?？梢允褂萌ルx子水或適當(dāng)?shù)木彌_液溶解，推薦使用 Tris-HCl、HEPES 或 CAPS 緩沖液（pH 6.8-11.1），這些緩沖液中 TCEP-HCl 非常穩(wěn)定。

*儲存：建議將 TCEP-HCl 儲存在密封容器中，室溫保存，避免氧化。

2. 使用濃度

*推薦濃度：對于大多數(shù)應(yīng)用，5-50 mM 的 TCEP-HCl 足以在室溫下幾分鐘內(nèi)還原多肽或蛋白質(zhì)中的二硫鍵。例如，30 µM 的 TCEP-HCl 可在 40 秒內(nèi)完q還原 20 µM 的二硫鍵。

*摩爾過量：通常建議使用過量的 TCEP-HCl（如 5-10 倍摩爾濃度）以確保完q還原。

3. 反應(yīng)條件

*pH 范圍：TCEP-HCl 在 pH 1.5-9.0 的范圍內(nèi)表現(xiàn)出良好的還原效果。在 pH < 8.0 時，其還原效果優(yōu)于 DTT。

*溫度：室溫下即可完成還原反應(yīng)，通常在幾分鐘內(nèi)即可完成。

4. 兼容性

*與馬來酰亞胺反應(yīng)：TCEP-HCl 不含硫醇，因此在進(jìn)行馬來酰亞胺標(biāo)記或交聯(lián)反應(yīng)時無需去除。

*SDS-PAGE：可以替代 DTT 或 2-巰基yi醇用于 SDS-PAGE 樣品緩沖液，使用終濃度為 50 mM。

5. 注意事項(xiàng)

*磷酸鹽緩沖液：TCEP-HCl 在磷酸鹽緩沖液（PBS）中不穩(wěn)定，尤其是在中性或堿性條件下，建議現(xiàn)配現(xiàn)用。

*金屬離子：避免與金屬接觸，因?yàn)榻饘匐x子可能會降低 TCEP-HCl 的活性。

*后續(xù)處理：還原后的樣品應(yīng)盡快使用，避免長時間放置導(dǎo)致二硫鍵重新形成。

常見問題及解決方式

1.問題描述：TCEP-HCl 在中性或堿性磷酸鹽緩沖液中容易被氧化，導(dǎo)致還原效果下降。

? 解決方法：

現(xiàn)配現(xiàn)用：如果需要在 PBS 中使用 TCEP-HCl，建議在使用前立即配制工作液。

避免長時間暴露：盡量減少溶液在中性 pH 條件下的暴露時間。

2. 問題描述：TCEP-HCl 與金屬接觸后，活性可能會降低。

? 解決方法：

避免金屬接觸：在配制和使用過程中，盡量使用塑料或玻璃容器，避免使用金屬容器。

3. 問題描述：在某些情況下，TCEP-HCl 可能無法完q還原二硫鍵。

? 解決方法：

增加濃度：確保使用足夠的摩爾過量（通常是 5-10 倍摩爾濃度）。

延長反應(yīng)時間：如果使用等摩爾濃度的 TCEP-HCl，反應(yīng)時間可能需要延長。

優(yōu)化 pH：確保反應(yīng)體系的 pH 在 TCEP-HCl 的有效范圍內(nèi)（pH 1.5-9.0），最佳 pH 為 6.8-8.0。

4.問題描述：TCEP-HCl 在儲存過程中可能會因氧化而失去活性。

? 解決方法：

密封保存：建議在室溫下密封保存，避免暴露在空氣中。

避免極d條件：避免長時間暴露在高溫或高濕度環(huán)境中。

5.問題描述：TCEP-HCl 帶正電荷，可能不適用于某些特定應(yīng)用，如等電聚焦（IEF）。

? 解決方法：

選擇替代品：在等電聚焦等應(yīng)用中，建議使用其他還原劑。

優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件：在其他兼容的應(yīng)用中（如 SDS-PAGE），使用終濃度為 50 mM 的 TCEP-HCl。

6. 問題描述：TCEP-HCl 對人體有害，操作時需注意安全。

? 解決方法：

個人防護(hù)：操作時應(yīng)穿戴實(shí)驗(yàn)服、一次性手套，并在通風(fēng)良好的環(huán)境中進(jìn)行。

避免接觸和吸入：避免 TCEP-HCl 直接接觸皮膚或吸入體內(nèi)。