來源不同
胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。 組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。 血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
胎牛血清,小牛血清和新生牛血清三種之間的區(qū)別:這三種血清的成份,總體沒有什么明顯差別,只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān),如上述有人說的抗體很等少。此外,因生長發(fā)育的需要,有些成分在小牛出生后會發(fā)生一些變化。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的差別。有一點可以肯定,胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。 zui為重要的一點是,胎牛本身生活在一個潔凈環(huán)境當(dāng)中,其血清與外界隔絕,只要生產(chǎn)工藝科學(xué)規(guī)范,其質(zhì)量肯定要比后兩者好。
根據(jù)牛出生時間和血清采制分離方法分為:1、胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血;2、新生牛血清:出生12-24小時新生牛靜脈采血;又可細(xì)分為:a.新生牛血清:采血后靜置自然析出的血清;b.標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清:c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;3.小牛血清:出生三月齡小牛動脈采血分離血清; 血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。 胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分zui少。 一般選用血清種類可以根據(jù)ATCC及實驗需要來選擇 。
一、特級類胎牛血清(zui別的,于干細(xì)胞的胎牛血清)
1、Hyclone 北美特級胎牛血清(SH30070.03) 目前,性能的血清,實驗室反饋不錯的,那就是Hyclone SH30070.03的特級胎牛血清, Hyclone的“頭牌”。 這款血清--Hyclone特級胎牛血清(Defined FBS),貨號:SH30070,是世界上*經(jīng)過40納米過濾的*胎牛血清,的促細(xì)胞生長作用及產(chǎn)品穩(wěn)定性。內(nèi)毒素含量小于10EU/ml,血紅蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以廣泛用于各種細(xì)胞培養(yǎng),包含任何干細(xì)胞系的培養(yǎng)。
2、Gibco北美特級胎牛血清(16000-044) invitrogen公司在美國原裝生產(chǎn)的特級胎牛血清,貨號:16000-044,是100nm過濾3次,內(nèi)毒素和血紅蛋白含量都可以與Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培養(yǎng)大部分的干細(xì)胞系。
二、優(yōu)等類胎牛血清
1、Hyclone加拿大優(yōu)等胎牛血清(SH30396) 的是Hyclone加拿大優(yōu)等胎牛血清(Characterizend FBS),貨號:SH30396,血清采自加拿大,由Hyclone公司總部的員工采集加工,采集方法,加工過程,檢定標(biāo)準(zhǔn)與美國原產(chǎn)優(yōu)等胎牛血清*一致,市場*美國原產(chǎn)的。經(jīng)過3次100nm過濾,內(nèi)毒素含量小于25EU/ml,血紅蛋白含量小于25mg/dl。此血清,在2005年以前,是很多實驗室選擇血清的,價格適中,質(zhì)量過硬,應(yīng)用細(xì)胞非常廣泛。 2、Hyclone澳大利亞優(yōu)等胎牛血清(SH30084) 基本與加拿大的優(yōu)等血清是一樣的,級別也非常相似,各種級別都有。
3、Gibco澳大利亞胎牛血清(10099-141)與Hyclone澳大利亞胎牛血清差不多,市場價也是3200元/500ml左右。這一級別的血清,也能用于干細(xì)胞培養(yǎng),可是,不象特級胎牛血清那么。 三、普通進(jìn)口胎牛血清 Hyclone南美胎牛血清(SV30087)
目前市場上用的zui多的Hyclone血清是南美胎牛血清(FBS) SV30087 ,此血清采自南美,在國內(nèi)(蘭州)過濾并測試檢驗,經(jīng)三次100納米過濾,根據(jù)中國商標(biāo)法的規(guī)定標(biāo)貼中文標(biāo)簽,內(nèi)毒素含量小于等于10EU/ml,血紅蛋白含量小于等于20mg/d。此血清廣泛用于各種腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng),還沒有資料記載能夠用于干細(xì)胞,也聽說有少數(shù)人用于干細(xì)胞培養(yǎng)的,不過,因為本身血紅素比較高,所以,不要用于干細(xì)胞,
四、國產(chǎn)的各種系列胎牛血清國產(chǎn)的胎牛血清,國內(nèi)沒有嚴(yán)格意義的胎牛血清,胎牛血清本身是需要穿刺取血的,而國內(nèi)都是剖腹產(chǎn)出胎牛,8小時左右取血,然后,進(jìn)行過濾分裝。所以,國產(chǎn)的胎牛血清不是嚴(yán)格意義的胎牛血清。不過也很多實驗室使用,具體情況那就看實驗的要求了。
五、其他血清新生牛血清,小牛血清,一般國產(chǎn)的,效果也還是不錯的,不過,不要用于細(xì)胞培養(yǎng),這些血清,大多是用于封閉液、保護液、緩沖液等等用途的。
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