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ELISA實(shí)驗(yàn)的操作步驟

來源:北京杰輝博高生物技術(shù)有限公司   2016年01月07日 15:48  

ELISA實(shí)驗(yàn)的操作步驟

elisa實(shí)驗(yàn)的成功操作步驟的正確起著至關(guān)重要的作用,一些老師剛接觸elisas方法可能對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作步驟不是很了解,現(xiàn)為您解說elisa實(shí)驗(yàn)詳細(xì)的操作步驟:
1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.  待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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