細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)服務(wù)
細(xì)胞周期的檢測(cè)
“細(xì)胞周期“也稱細(xì)胞分裂周期”,是指一 個(gè)細(xì)胞經(jīng)生長(zhǎng)、分裂而增殖成兩個(gè)所經(jīng)歷的全過程,通??煞譃槿舾呻A段,即G1期、S期、G2期和M期。細(xì)胞在G1期完成必要的生長(zhǎng)和物質(zhì)準(zhǔn)備,在S期完成其遺傳物質(zhì)一染色體DNA的復(fù)制, 在G2期進(jìn)行必要的檢查及修復(fù)以保證DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性,然后在M期完成遺傳物質(zhì)到子細(xì)胞中的均等分配,并使細(xì)胞一分為二。
細(xì)胞周期檢測(cè)手段
1.細(xì)胞計(jì)數(shù)法;
2. BrdU滲入法;
3.流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定法(PI染色法) ;
4.同位素標(biāo)記法(標(biāo)記有絲分裂百分率) ;
5.免疫熒光染色[p27K-和hCdt1(30/120)等。
與細(xì)胞周期相關(guān)常見疾病
白血病(白血病的病因之-可能是造血干細(xì)胞不能正常分裂,喪失造血功能所導(dǎo)致的)腎病(很多腎臟疾病,特別是那些有炎癥反應(yīng)的腎小球病變與腎小管間質(zhì)病變,都伴有明顯的細(xì)胞數(shù)量增多。腎小球與腎小
管間質(zhì)細(xì)胞的增生進(jìn)而又促進(jìn))皮膚病(皮膚細(xì)胞非正常增生引起)
參與細(xì)胞周期調(diào)控的幾種蛋白
1.周期蛋白依賴性蛋白激酶(CDK) : CDC2與細(xì)胞周期蛋白結(jié)合才具有激酶的活性,故名細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase, CDK)。
2.周期蛋白(Cyclin) :參與細(xì)胞周期調(diào)控的蛋白,并且其濃度在細(xì)胞周期中是浮動(dòng)的呈周期性變化。隨著細(xì)胞周期階段的不同,有時(shí)濃度高達(dá)幾千倍,有時(shí)又降為季。周期蛋白作為一種調(diào)節(jié)亞基,與周期蛋白依賴性的蛋白激酶結(jié)合并將之激活
3.周期蛋白依賴性蛋白激酶抑制因子(CKI) :能夠與周期蛋白依賴性激酶結(jié)臺(tái)并抑制其活性的蛋白質(zhì)。在哺孚動(dòng)物中分為兩個(gè)家族即CIPKIP和INK4家族。
不同類型的CDK/cyclin復(fù)合體
激酶復(fù)合體 | 脊椎動(dòng)物 | 芽殖酵母 | ||
Cyalin | CDK | Cyclin | CDK | |
G1-CDK | Cyclin D* | CDK4、6 | CIn 3 | CDK1(CDC28) |
G/S-CDK | Cyclin E | CDK2 | CIn 1.2 | CDK1(CDC28) |
S-CDK | Cyclin A | CDK2 | CIb 5.6 | CDK1(CDC28) |
M-CDK | Cyclin B | CDK1(CDC2) | CIb 1-4 | CDK1(CDC28) |
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