◆ 概述
原位雜交組織(或細胞)化學 (In situ Hybridization Histochemistry, ISHH) 簡稱原位雜交(In Situ Hybridization),屬于固相分子雜交的范疇,它是用標記的DNA或RNA為探針,在原位檢測組織細胞內(nèi)特定核酸序列的方法。根據(jù)所用探針和靶核酸的不同
,原位雜交可分為DNA-DNA雜交,DNA-RNA雜交和RNA-RNA雜交三類。根據(jù)探針的標記物是否直接被檢測,原位雜交又可分為直接法和間接法兩類。直接法主要用放射性同位素、熒光及某些酶標記的探針與靶核酸進行雜交,雜交后分別通過放射自顯影、熒光顯微鏡術或成色酶促反應直接顯示。間接法一般用半抗原標記探針,zui后通過免疫組織化學法對半抗原定位,間接地顯示探針與靶核酸形成的雜交體。
原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響,因此對于那些細胞數(shù)量少且散在于其他組織中的細胞內(nèi)DNA或RNA研究更為方便;同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸,對于組織中含量極低的靶序列有*的敏感性,并可完整地保持組織與細胞的形態(tài),更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態(tài)。