RNA反義純化(RAP) 實(shí)驗(yàn)服務(wù)
實(shí)驗(yàn)意義
探究轉(zhuǎn)錄后水平RNA與蛋白質(zhì)的相互作用,以及轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的動(dòng)態(tài)變化,可了解惡性腫瘤以及遺傳學(xué)疾病等轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的動(dòng)態(tài)變化,應(yīng)用于病理診斷和科學(xué)研究工作等。
實(shí)驗(yàn)原理
RNA反義純化(RNA Antisense Purification, RAP)設(shè)計(jì)- -段與目標(biāo)RNA互補(bǔ)的穿核苷酸探針,并對(duì)其進(jìn)行生物素標(biāo)記,使用該探針將目標(biāo)RNA拉下來,同時(shí)與目標(biāo)RNA相互作用的蛋白也被捕獲,然后經(jīng)鏈霉親和素標(biāo)記的磁珠純化,通過Real
Tme RT-PCR. WB、二代測(cè)序或質(zhì)譜進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定。
實(shí)驗(yàn)流程
1.探針設(shè)計(jì)
2.待測(cè)樣品準(zhǔn)備(細(xì)胞、組織或待測(cè)RNA和蛋白質(zhì)等)
3.生物素標(biāo)記探針與RNA雜交
4.RAP
5.分離RNA和蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定分析。
結(jié)果展示
實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
1.實(shí)驗(yàn)周期: 1-3個(gè)月
2.交付標(biāo)準(zhǔn): RAP鑒定結(jié)果報(bào)告、分析報(bào)告、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑、耗材、實(shí)驗(yàn)步驟)。原始數(shù)據(jù)等
需確認(rèn)的信息
1.目的基因及種屬以及ID號(hào)。
2.目的基因序列
3.樣本數(shù)量及分析要求