五月婷网站,av先锋丝袜天堂,看全色黄大色大片免费久久怂,中国人免费观看的视频在线,亚洲国产日本,毛片96视频免费观看

翊圣生物提供高成功率糖尿病建模用STZ：純度≥98%（HPLC測(cè)定）。

文章包含以下知識(shí)點(diǎn)

1. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)SOP

2. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型建模效果評(píng)估指標(biāo)

3. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的失敗原因解析

4. STZ誘導(dǎo)小/大鼠死亡率高的原因解析

5. 糖尿病建模的影響因素

6. STZ建模方法思路梳理

7. 高建模成功率STZ使用指南

絕大多數(shù)由化學(xué)藥物誘導(dǎo)的動(dòng)物疾病模型具備標(biāo)準(zhǔn)化思路，是用一定劑量的某種化學(xué)藥物借助某種手段抵達(dá)正常組織/器官，并在處理一段時(shí)間后評(píng)估疾病指標(biāo)。下面就從幾個(gè)方面梳理建立鏈脲佐菌素（Streptozocin，STZ）誘導(dǎo)的糖尿病疾病模型的思路。

1.STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)SOP

1.1 動(dòng)物的準(zhǔn)備

盡量選用雄性動(dòng)物，雌性含有激素影響建模效率。有研究顯示，雌性動(dòng)物成模率差，而且可能會(huì)比雄性出現(xiàn)更高死亡率，尤其是I型。

I型糖尿?。═ype I diabetes）一般按照體重選擇即可，推薦大鼠170-200g，小鼠17-22g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1~2周后空腹注射STZ，成模率相對(duì)理想。

II型糖尿?。═ype II diabetes）對(duì)于大鼠（比如SD/Wistar），選取4-5周齡，體重在90-100g，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達(dá)240-280g。 對(duì)于小鼠（比如C57/ICR/昆明小鼠），選取4-5周齡，體重在16-20g，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達(dá)30-35g。 對(duì)于新購(gòu)入動(dòng)物或更換飼養(yǎng)環(huán)境需要先用普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，然后再選擇適合周齡/體重動(dòng)物轉(zhuǎn)用高脂高糖飼料繼續(xù)喂養(yǎng)。從模型建立成功率來看，大鼠推薦用SD，小鼠推薦C57。

1.2 造模前的喂養(yǎng)

造膜前的喂養(yǎng)，Ⅰ型糖尿病模型成模比較快，通常大鼠在普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后即可開始造模；Ⅱ型糖尿病模型：高脂飲食誘導(dǎo)加小劑量STZ。造模前喂以高脂(高糖)飼料，誘發(fā)出胰島素抵抗。

1.3 試劑的準(zhǔn)備

①高脂(高糖)飼料

高脂(高糖)飼料成分：其中含10%蔗糖，10%豬油，5%膽固醇

由基礎(chǔ)鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按質(zhì)量比搭配制作高脂高糖飼料：其比例為豬油18 % ,蔗糖20 % ,蛋黃3 % ,基礎(chǔ)飼料59 %。

②STZ溶劑——檸檬酸鈉緩沖液的配制

A液和B液的配制：稱取檸檬酸(FW:210.14) 2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液；稱取檸檬酸鈉(FW:294.10) 2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液。

檸檬酸鈉緩沖液的配制：將A、B液按一定比例混合（1：1.32也有按1:1的），pH計(jì)測(cè)定pH值，調(diào)節(jié)pH值到4.2-4.5，即是所需檸檬酸鈉緩沖液。

1.4 注射前準(zhǔn)備

配制STZ注射液前，STZ凍干粉放置于干燥滅菌瓶?jī)?nèi)，外用鋁箔紙或錫紙包好，與檸檬酸鈉緩沖液一起置于冰浴預(yù)冷，帶到動(dòng)物房備用。

注意：STZ凍干粉從−20°C冰箱取出后，于室溫干燥避光放置10min左右，使其*解凍（很重要）。

1.5 配制注射液

大鼠過夜禁食（不禁水）后稱重并測(cè)血糖濃度。對(duì)大鼠進(jìn)行分組，以便按照動(dòng)物數(shù)目和注射劑量來準(zhǔn)備STZ注射液。以1%濃度（w/V）溶解STZ，過濾消毒，切記STZ*溶解。

注意：①STZ不穩(wěn)定，易失活，快速稱取后剩余試劑仍要求干燥避光，推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙包裹。②注射時(shí)若操作不熟練，切忌不可一次性溶解完STZ。建議根據(jù)操作熟練度，分組溶解STZ，比如10只或15只鼠/組。③亦可提前將STZ按動(dòng)物分組的所需量稱重，分裝。

1.6 注射

按動(dòng)物空腹體重腹腔或尾靜脈注射。如果注射操作技術(shù)不熟練，應(yīng)兩組交替注射，注射應(yīng)在30分鐘內(nèi)完畢。注意：注射大多要求快速注射。

注意：①Ⅰ型糖尿病模型：大鼠劑量為70～65mg/kg

Ⅱ型糖尿病模型：高糖高脂喂養(yǎng)1～2 個(gè)月的大鼠,STZ 劑量在25～40mg/kg。

1.7 注射后

注射完STZ后要給予動(dòng)物足夠的水、食物（糖尿病鼠的基本生活特征），需每日換墊料，保持鼠籠干燥。飼養(yǎng)時(shí)，注意避免強(qiáng)日光照射。盡可能勤消毒。

注意：STZ造模后，明顯血糖水平波動(dòng)呈現(xiàn)3個(gè)時(shí)相，一時(shí)性高血糖（1-2h）、短暫低血糖（6-10h）、持續(xù)高血糖（>72h）。必須適當(dāng)補(bǔ)給胰島素和葡萄糖。

2. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型建模效果評(píng)估指標(biāo)

與對(duì)照組對(duì)比，統(tǒng)計(jì)以下指標(biāo)：

2.1 一般性指標(biāo)：出現(xiàn)多飲、多食、多尿現(xiàn)象，體重下降；

2.2 其他指標(biāo)：空腹血糖、空腹血清胰島素水平、血清胰島素水平、胰島素敏感性、糖耐量等；

2.3 血清生化指標(biāo)：T-Cho、TG、HDL-C、LDL-C、CR、BUN、Alt等。

2.4 病理切片：胰腺組織病理切片

3.STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的失敗原因解析

3.1 STZ的品質(zhì)是關(guān)鍵，建模用STZ純度應(yīng)不低于98%（HPLC檢測(cè)）。

3.2 STZ失效：應(yīng)干燥保存，避免受潮。粉末避免長(zhǎng)時(shí)間室溫放置，溶解的STZ是非常不穩(wěn)定的，在中性pH值的半衰期為15分鐘。注意用酸性pH值溶解STZ，*放在冰浴里。（了解更多STZ的使用，可查看：h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002 ）

3.3 腹腔注射是否注射到腸子等臟器。

模型不*，建議，再觀察3天，還是不成模型的話，重新注射一次。

4.STZ誘導(dǎo)小/大鼠死亡率高的原因解析

4.1 鼠的體重過低；

4.2 一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導(dǎo)致死鼠);

4.3 高血糖和低血糖都會(huì)造成死鼠，避免死鼠可以通過注射胰島素或暫時(shí)補(bǔ)糖，兩種途徑： ①常見為血糖過高。補(bǔ)胰島素法，補(bǔ)一些中效胰島素。例如給諾和靈n或NPH(中性魚精蛋白鋅胰島素),每次2-3個(gè)單位，過了3-5天，大鼠一般死亡率就低了；②補(bǔ)糖法，禁食后的鼠，注射的時(shí)候已經(jīng)處于低血糖狀態(tài)，造模4小時(shí)后腹腔注射20%的葡萄糖，可避免因注射時(shí)血糖過低死鼠；

4.4 防止動(dòng)物自相殘殺。食物缺乏和供水不足的情況下，會(huì)互相撕殺、啃食同類，所以食物和飲水要供應(yīng)充足，*是兩路供應(yīng);

4.5 防止感染。糖尿病大鼠尿量多，墊料潮濕，需要勤換墊料，所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現(xiàn)感染，特別是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血測(cè)血糖等侵入性操作前后，要注意消毒工作。如每次采血測(cè)血糖后可用四環(huán)素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預(yù)防感染。

5.糖尿病建模的影響因素

糖尿病疾病模型的影響因素包括STZ建模試劑的質(zhì)量、動(dòng)物狀況及給藥方式等。其中，試劑主要性能為純度、穩(wěn)定性、溶解特性等，動(dòng)物狀況主要包括遺傳背景，雌雄，性別，體重，飼養(yǎng)環(huán)境，飲食結(jié)構(gòu)等，給藥方式包括給藥時(shí)間、給藥間隔和給藥途徑。差異化的因素帶來差異化的建模效果。

6.STZ建模方法思路梳理

影響因素標(biāo)準(zhǔn)化是實(shí)現(xiàn)建模目的及建模穩(wěn)定性的保證。理論上，所有的動(dòng)物建模實(shí)驗(yàn)均要求預(yù)實(shí)驗(yàn)。

以STZ誘導(dǎo)糖尿病模型而言，實(shí)驗(yàn)時(shí)STZ的給藥量應(yīng)參照預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，盡量不要盲目按照文獻(xiàn)上或他人的給藥量來直接使用，鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力、禁食時(shí)長(zhǎng)、注射選時(shí)、以及之前飼養(yǎng)過程、測(cè)糖選時(shí)等都不相同，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定符合自己實(shí)驗(yàn)鼠的給藥計(jì)量，才是蕞科學(xué)的。

7.高建模成功率STZ使用指南

STZ保存、溶解、分裝等使用注意事項(xiàng)，詳見h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002