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翊圣推出華大MGI平臺(tái)整體解決方案
“基因科技,造福人類”是華大基因堅(jiān)持不變的使命,近幾年隨著華大技術(shù)的不斷突破,測序平臺(tái)的不斷完善,華大基因已經(jīng)成為國產(chǎn)高通量測序儀的中堅(jiān)力量。
“國產(chǎn)試劑,助力中國智造”,致力于成為分子酶產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新者,翊圣生物一直保持對(duì)高通量測序技術(shù)的高度關(guān)注,并長期專注于分子酶原料及建庫試劑盒等產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn),加上與華大平臺(tái)的密切合作,現(xiàn)推出華大平臺(tái)建庫的完整解決方案,可滿足主流的測序應(yīng)用。
解決方案part1
Hieff NGS® Ultima DNA Library Prep Kit for MGI®
——全能型DNA建庫試劑盒,建庫試劑“*”
★適用樣本類型廣: cfDNA、FFPE在內(nèi)的所有樣本均能獲得優(yōu)異文庫
★應(yīng)用范圍廣:應(yīng)用于全基因組測序、靶向捕獲測序、Chip-seq等
★兩大秘密武器:*效連接酶與強(qiáng)擴(kuò)增效率高保真酶
★品質(zhì)穩(wěn)定:嚴(yán)格的批次性能與穩(wěn)定性質(zhì)控
數(shù)據(jù)展示:
1)13310建庫試劑盒適用于不同樣本,均可高效建庫
Template | 1 ng—cfDNA | 50 ng—小牛超聲 | 10 ng—FFPE超聲 | |||
建庫試劑 | 小樣 | 對(duì)照 | 小樣 | 對(duì)照 | 小樣 | 對(duì)照 |
Cycles | 13 | 8 | 10 | |||
Concentration (ng/μL) | 32.6 29.6 | 30.2 30.4 | 87.6 82.8 | 82.6 79.0 | 59.6 68.0 | 50.4 53.6 |
Average | 31.1 | 30.3 | 85.2 | 80.8 | 63.8 | 52.0 |
Total(ng) | 995.2 | 969.6 | 2726 | 2585 | 2041 | 1664 |
2)使用13310建庫試劑可獲得高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)
全基因組測序(WGS)
樣本信息:human cell line N12878
試劑盒:Yeasen機(jī)械Vs MGI demo
測序類型:MGISEQ-2000 High-throughput Sequencing Set (PE 150)
數(shù)據(jù)分析:MegaBOLT+GATK
結(jié)論:Yeasen機(jī)械法建庫試劑,上機(jī)測試結(jié)果與華大demo相比,SNP變異檢測性能一致,INDEL變異檢測性能更高。
| Yeasen-超聲約150ng | MGI-demo | ||
1-1 | 1-2 | 2-1 | 2-2 | |
Raw bases (bp) | 92238502500 | 86419274400 | 95887631200 | 95354400400 |
GC content (%) | 41.19 | 41.16 | 41.55 | 41.56 |
Clean Q20 (%) | 95.615 | 95.53 | 97.13 | 97.115 |
Clean Q30 (%) | 86.475 | 86.285 | 89.915 | 89.925 |
Mapping rate (%) | 99.42 | 99.41 | 99.36 | 99.33 |
Duplicate rate (%) | 0.83 | 0.79 | 2.5 | 2.51 |
snp_Precision | 0.9989 | 0.9987 | 0.9988 | 0.9986 |
snp_Sensitivity | 0.9905 | 0.9918 | 0.9816 | 0.9854 |
snp_F-measure | 0.9947 | 0.9952 | 0.9901 | 0.992 |
indel_Precision | 0.9459 | 0.9431 | 0.932 | 0.9322 |
indel_Sensitivity | 0.9189 | 0.9105 | 0.8766 | 0.8759 |
indel_F-measure | 0.9322 | 0.9265 | 0.9034 | 0.9032 |
解決方案part2
Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for MGI®
——酶切法建庫試劑盒,酶切“一步法”
★操作簡便:樣本片段化到接頭連接,一管內(nèi)完成;
★高效的片段化酶:偏好性極低,完美替代轉(zhuǎn)座酶法建庫;
★投入量范圍廣:500 pg-1 μg DNA樣本實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定建庫;
★試用樣本多:基因組DNA、全長cDNA、FFPE DNA樣本。
數(shù)據(jù)展示:
1)高效酶切,酶切產(chǎn)物片段大小只與酶切時(shí)間有關(guān),與樣本的投入量和樣本的GC含量均無相關(guān)性。
2)適用多樣本建庫,不同投入量,酶切均可高效建庫
Template | 500pg 小牛 | 2ng-小牛 | 100ng-小牛 | 5ng-FFPE | 10ng-FFPE | |||||
建庫試劑 | 小樣 | 對(duì)照 | 小樣 | 對(duì)照 | 小樣 | 對(duì)照 | 小樣 | 對(duì)照 | 小樣 | 對(duì)照 |
Cycles | 14 | 11 | 7 | 11 | 11 | |||||
Concentration (ng/μL) | 14.0 | 17.5 | 17 | 16.6 | 114 | 93.8 | 22.6 | 17.3 | 34.0 | 31.2 |
Total(ng) | 448 | 560 | 544 | 531.2 | 3648 | 3001.6 | 723.2 | 553.6 | 1088 | 998.4 |
3)酶切建庫可獲得高質(zhì)量測序數(shù)據(jù)
全基因組測序(WGS)
樣本信息:human cell line N12878
試劑盒:Yeasen酶切法Vs Enzy* 酶切
測序類型:MGISEQ-2000 High-throughput Sequencing Set (PE 100)
數(shù)據(jù)分析:MegaBOLT+GATK
結(jié)論:Yeasen酶切法建庫試劑盒對(duì)比Enzy* 酶切法建庫,SNP變異檢測性能更強(qiáng),INDEL變異檢測性能更高。
| Yea-50ng-酶切 | Enzy-50ng-酶切 | ||
3-1 | 3-2 | 4-1 | 4-2 | |
Raw bases (bp) | 109966280700 | 101567894100 | 90543565800 | 107930258600 |
GC content (%) | 41.17 | 41.23 | 40.43 | 40.25 |
Clean Q20 (%) | 98.205 | 98.315 | 98.405 | 98.36 |
Clean Q30 (%) | 92.66 | 93.005 | 93.425 | 93.255 |
Mapping rate (%) | 99.55 | 99.57 | 99.58 | 99.56 |
Duplicate rate (%) | 2.49 | 2.8 | 2.32 | 2.63 |
snp_Precision | 0.9988 | 0.9987 | 0.9975 | 0.9978 |
snp_Sensitivity | 0.9905 | 0.988 | 0.9819 | 0.9839 |
snp_F-measure | 0.9946 | 0.9933 | 0.9897 | 0.9908 |
indel_Precision | 0.913 | 0.9091 | 0.8888 | 0.89 |
indel_Sensitivity | 0.9026 | 0.8911 | 0.8477 | 0.8639 |
indel_F-measure | 0.9078 | 0.9 | 0.8678 | 0.8768 |
解決方案part3
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Cyclization Kit for MGI®
——高效環(huán)化試劑盒,兼容主流建庫試劑
★適用范圍廣:兼容主流建庫試劑盒(KAPA、華大等);
★快速環(huán)化:1小時(shí)快速環(huán)化,產(chǎn)物滿足DNB制備;
★環(huán)化效率高: cfDNA環(huán)化效率>30%,其它樣本>40%;
★品質(zhì)穩(wěn)定:嚴(yán)格的批次性能與穩(wěn)定性質(zhì)控。
解決方案part4
Hieff NGS® MaxUp II Dual-mode mRNA Library Prep Kit for MGI®
——兼容常規(guī)鏈與鏈特異性建庫試劑盒,mRNA建庫“一盒雙用”
★樣本適用范圍廣:耐高溫,適合復(fù)雜模板 mRNA 建庫;
★片段化可控: 片段大小均可選擇合適的打斷條件;
★文庫質(zhì)量優(yōu)異: 多樣本類型測試,結(jié)果均能滿足不同客戶需求;
★測序質(zhì)量優(yōu)異: rRNA 殘留更低,有效數(shù)據(jù)占比更多。
解決方案part5
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI®
配套接頭——滿足96種樣本數(shù)據(jù)的拆分
Hieff NGS® DNA Selection Beads
精準(zhǔn)分選——完美替換AMPure XP
dsDNA HS Assay Kit for Qubit®
雙鏈DNA定量神器——5min精確定量文庫
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品信息 | 名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
全能型建庫試劑盒 | Hieff NGS® Ultima DNA Library Prep Kit for MGI® | 13310ES08/16/96 | 8/16/96T |
酶切法建庫試劑盒 | Hieff NGS® OnePot II DNA Library Prep Kit for MGI® | 13321ES08/16/96 | 8/16/96T |
mRNA建庫試劑盒 | Hieff NGS® MaxUp II Dual-mode mRNA Library Prep Kit for MGI® | 13331ES08/16/96 | 8/16/96T |
環(huán)化試劑盒 | Hieff NGS® Fast-Pace DNA Cyclization Kit for MGI® | 13341ES08/16/96 | 8/16/96T |
rRNA去除試劑盒 | Hieff NGS® MaxUp rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat) | 12253ES08/24/96 | 8/24/96T |
接頭 | Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI® | 13360-62 | 4/16/100T |
磁珠 | Hieff NGS® DNA Selection Beads | 12601ES08/56/75 | 5/60/450mL |
Qubit定量 | dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES60/76 | 100/500T |