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膠原蛋白（Collagen）是一種高分子功能性蛋白質(zhì)，也是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分，比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富；II型膠原在透明軟骨中含量豐富；III型膠原在皮膚、血管內(nèi)膜、腸道中含量豐富，彈性較好。不同類型的膠原蛋白在醫(yī)療、美容、醫(yī)學(xué)和科學(xué)研究領(lǐng)域有著重要的應(yīng)用。
其中I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成300 nm長的異源多聚體。當(dāng)用作凝膠時，膠原蛋白有助于體外培養(yǎng)并增強(qiáng)細(xì)胞特異性形態(tài)和功能的表達(dá)。翌圣生物生產(chǎn)的I型鼠尾膠原蛋白來源于天然小鼠鼠尾巴和SD大鼠鼠尾巴，制作的膠原蛋白產(chǎn)品溶于0.02M HAc溶液，無菌包裝?？捎糜诒右源龠M(jìn)附著，應(yīng)用包括研究腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移，單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)或分化研究，以及粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的放射自顯影研究，以及維持肝細(xì)胞功能，分化狀態(tài)和肝細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄水平的升高等研究。
膠原蛋白的生產(chǎn)方式（來源：開源證券）
翌圣生物提供來自于大鼠和小鼠尾的I型膠原蛋白，不僅產(chǎn)量足、純度高、蛋白濃度豐富，品質(zhì)更佳，且經(jīng)過具體的應(yīng)用驗(yàn)證，得到結(jié)果與預(yù)期一致。
生產(chǎn)質(zhì)控
無塵車間內(nèi)生產(chǎn)，保證潔凈度；
來源小鼠和SD大鼠鼠尾巴；
單批產(chǎn)量達(dá)3L，滿足大規(guī)模使用需要；
通過細(xì)胞培養(yǎng)測試(包括三維膠細(xì)胞培養(yǎng))；
電泳結(jié)果蛋白濃度＞90 %（SDS-PAGE）；
產(chǎn)品為無菌溶液，無支原體污染。
應(yīng)用方法
薄層包被程序
【注意】：包被濃度為5-10 µg/cm2，推薦濃度選5 µg/cm2。建議根據(jù)具體的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化。
1）膠原蛋白I用0.02 M乙酸稀釋配置50 μg/ mL工作液，膠原蛋白I不溶于中性pH溶液；
2）以5 µg/cm2涂布培養(yǎng)皿，例如：35 mm的培養(yǎng)皿的表面積約為10 cm2，1~2 mL的工作液足以覆蓋此皿；
3）室溫孵育1小時；
4）小心吸取剩余溶液，用PBS或無血清培養(yǎng)基洗滌以除去多余乙酸；
5）組織培養(yǎng)皿包被后可立即使用，也可風(fēng)干，在2-8℃無菌條件下可貯存長達(dá)一周。
膠凝程序
膠原蛋白I按以下步驟使其pH達(dá)到弱堿性時凝膠
1）將無菌5 cm左右的紗布海綿貼在150 mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和，把蓋子放在150 mm的培養(yǎng)皿上，暫放置一邊；
2）將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上，厚度可以根據(jù)需要改變，膠原蛋白I（50-100 μL）足以涂覆22 mm的蓋玻片。對于直徑100 mm的培養(yǎng)皿，每個加入約6 mL; 對于60 mm培養(yǎng)皿添加約2.3 mL，對于35 mm培養(yǎng)皿添加約1 mL；
3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘；
4）在無菌蒸餾水中（35 mm培養(yǎng)皿加5 mL等）浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30 min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0 mL無菌蒸餾水，放置在層流罩中過夜；
5）吸出蒸餾水，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。
圖.mcf-7細(xì)胞鼠尾膠原包被處理和未包被處理對比結(jié)果
圖.NIH-3T3細(xì)胞在三維膠原中生長的結(jié)果
產(chǎn)品訂購
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾膠原蛋白I （大鼠尾） | 40125ES10/50 | 2/10 mL |
Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail鼠尾膠原蛋白I型（小鼠尾） | 40136ES10/50 | 2/10 mL |
相關(guān)產(chǎn)品
類型 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 應(yīng)用方向 |
基本濃度 8-12 mg/ml | 40183 | Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠 | 適應(yīng)于2D和3D培養(yǎng)、侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)，也可以用于體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn) |
40184 | Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 主要應(yīng)用于需要顏色檢測如熒光檢測實(shí)驗(yàn)等 | |
高濃度 ≥18mg/ml | 40187 | Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
主要應(yīng)用于如血管生成、凝膠栓塞和體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)（對于血管生成建議基質(zhì)膠終濃度要≥10mg/ml） |
40189 | Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | ||
40188 | Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | ||
低生長因子 | 40185 | Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
主要是排除生長因子對實(shí)驗(yàn)的干擾。應(yīng)用于與生長因子、信號通路等相關(guān)研究。無酚紅的也用來做類器官培養(yǎng) |
40186 | Ceturegel® Matrix GFR，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | ||
干細(xì)胞用 | 40190 | Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 主要用于如hESC，iPSC等干細(xì)胞培養(yǎng) |
類器官用 | 40191 | Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 類器官培養(yǎng)專用基質(zhì)膠 |
