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在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，“黑膠蟲"污染常常成為一大難題，“黑膠蟲"及其分解的復(fù)合物是一種細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)常見的細(xì)胞污染物。它在普通倒置顯微鏡的低倍鏡下呈現(xiàn)點(diǎn)狀或碎片狀的黑色顆粒，在高倍鏡下可看到這些黑色顆粒進(jìn)行原地振動(dòng)（類似布朗運(yùn)動(dòng)）。想要告別黑膠蟲污染，首先需要準(zhǔn)確識別污染類型。一旦確認(rèn)為黑膠蟲污染，便可以采取相應(yīng)的措施，使用黑膠蟲清除劑（60725ES）來解決問題。
判斷黑膠蟲污染的方法
培養(yǎng)基不渾濁，但在顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞周圍和培養(yǎng)液中有很多小黑點(diǎn)，且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長小黑點(diǎn)逐漸增多，更換培養(yǎng)基或洗滌細(xì)胞無效；
培養(yǎng)基中常添加的青霉素、鏈霉素、慶大霉素等抗生素對其無效；
可能通過培養(yǎng)箱空氣進(jìn)行傳染；
黑膠蟲與細(xì)胞競爭性生長，使細(xì)胞生長緩慢，細(xì)胞狀態(tài)差，空泡化嚴(yán)重，甚至還可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)的改變。
黑膠蟲清除劑的成分與作用
黑膠蟲清除劑的主要成分為抗菌素，可以有效的控制和殺滅血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞中的黑膠蟲，同時(shí)對常見的細(xì)菌也有一定的清除作用，幾乎不影響細(xì)胞本身的生長增殖，可挽救珍貴細(xì)胞。
黑膠蟲清除劑的優(yōu)點(diǎn)
高效清除
黑膠蟲清除劑能夠有效控制和殺滅血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞中的黑膠蟲，同時(shí)對常見的細(xì)菌也有一定的清除作用。
不影響細(xì)胞生長
在清除黑膠蟲的同時(shí)，幾乎不影響細(xì)胞本身的生長增殖，保證細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
使用方便
可以根據(jù)需要選擇不同的稀釋倍數(shù)，推薦1:500，并按照推薦的比例加入培養(yǎng)基中進(jìn)行處理。
使用方法
準(zhǔn)備階段
使用前請瞬時(shí)離心混勻，用75%乙醇擦拭后放入超凈臺中，輕輕晃動(dòng)混勻。
稀釋與加入
棄掉舊培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞2-3次，加入新的含有黑膠蟲清除劑的培養(yǎng)基（推薦稀釋比例為1:500，如5 mL培養(yǎng)基中加入10 μL黑膠蟲清除劑）。
處理時(shí)間
每2天用以上含有黑膠蟲清除劑的培養(yǎng)基換液或傳代一次，連續(xù)處理3次，黑膠蟲即可明顯消除，若污染較為嚴(yán)重，可延長處理3-5天。
應(yīng)用效果對比圖
圖1.黑膠蟲清除劑使用前后對比圖[注：圖片來源于網(wǎng)絡(luò)]
如圖所示，黑膠蟲清除劑能夠有效地清除污染，恢復(fù)細(xì)胞培養(yǎng)的正常狀態(tài)。
注意事項(xiàng)
在使用黑膠蟲清除劑時(shí)，還應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室的無菌操作和環(huán)境控制，以防止新的污染發(fā)生。同時(shí)，對于嚴(yán)重污染的細(xì)胞培養(yǎng)，可能需要考慮丟棄并重新開始，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。如果污染問題持續(xù)存在，可能需要進(jìn)一步調(diào)查污染源，并采取相應(yīng)的預(yù)防措施。
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產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 適用場景 |
Nanobacteria Removal Agent 黑膠蟲清除劑(500×) | 60725ES | 400 μL | 控制和殺滅血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞中的黑膠蟲 |
Paenibacillus Rid 類牙孢桿菌清除劑（2000X） | 60735ES | 100 μL/5 x 100 μL | 清除細(xì)胞類芽孢桿菌污染 |
MycAwayl™ Treatment (1000×) - Mycoplasma Elimination Reagent MycAwayl™ 支原體去除試劑（1000×） | 40607ES | 100 μL/1 mL/5 mL | 支原體去除 |
Penicillin-Streptomycin (100×), Suitable for Cell culture 細(xì)胞培養(yǎng)用青霉素-鏈霉素（雙抗） | 60162ES | 100 mL | 抑制多數(shù)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的生長 |
青霉素-鏈霉素-新霉素 (PSN)（三抗），100X | 60290ES | 100 mL | 對革蘭陽性細(xì)菌和革蘭陰性細(xì)菌具有較好的聯(lián)合抗菌作用 |
青霉素-鏈霉素-兩性霉素B（三抗），100X | 60291ES | 100 mL | 青霉素和鏈霉素抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，兩性霉素B抑制霉菌生長 |
Water Bath Cleaner 水浴鍋抑菌劑(500X) | 60733ES | 100 mL | 細(xì)胞房、實(shí)驗(yàn)室等水浴鍋或培養(yǎng)箱水槽內(nèi)水體中細(xì)菌、真菌、支原體、藻類等微生物的抑制和清除 |
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