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Endonuclease IV（核酸內(nèi)切酶IV）又稱為Nfo，是一種多功能的核酸內(nèi)切酶。它主要功能是識別DNA鏈中的脫嘌呤/脫嘧啶位點(diǎn)（AP位點(diǎn)），通過切割A(yù)P位點(diǎn)5'端的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生3'-羥基和5'-脫氧核糖磷酸末端（dRP）（圖1）。此外，該酶還具有在DNA的3′末端釋放磷酸甘油醛、完整的脫氧核糖 5′-磷酸和磷酸的3'-二酯酶活性；以及在DNA鏈上從3'—5'方向移除核苷酸的3'-5'外切酶活性。
圖1. Endonuclease IV反應(yīng)原理示意圖
Endonuclease IV可用于：
FFPE樣本修復(fù)中水解AP位點(diǎn)行成切刻，為DNA修復(fù)提供關(guān)鍵起始位點(diǎn)；
單細(xì)胞凝膠電泳（彗星試驗）；
堿洗脫、堿解旋等。
翌圣酶研發(fā)團(tuán)隊潛心研發(fā)，成功推出市售Endonuclease IV(Cat#14543ES)，翌圣Endonuclease IV不含非特異性DNA酶殘留，大腸桿菌宿主gDNA殘留＜0.05 copies/10U。
不含非特異性DNase殘留
20 μL反應(yīng)體系中，加入不同批次的100 U Endonuclease IV和 0.5 μg λDNA-HindⅢ digest，37℃孵育16 h，瓊脂糖凝膠電泳DNA譜帶不發(fā)生變化，表明翌圣Endonuclease IV不含非特異性DNase殘留。
圖2. 非特異性DNase殘留
宿主(E.coli)gDNA殘留＜0.05 copies/10U
對不同批次的翌圣Endonuclease IV進(jìn)行宿主(E.coli)基因組DNA殘留檢測，結(jié)果顯示翌圣Endonuclease IV的宿主gDNA殘留＜0.05 copies/10 U。
圖3. 宿主gDNA殘留
