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殺稻瘟菌素S的作用原理
殺稻瘟菌素S（Blasticidin S）是一種從灰色鏈霉菌（Streptomyces griseochromogenes）中提取的核苷類抗生素，主要通過(guò)干擾核糖體中肽鍵的形成來(lái)特異性抑制原核和真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成。其具體作用機(jī)制包括阻斷釋放因子誘導(dǎo)的肽基-tRNA水解，并增強(qiáng)tRNA與核糖體大亞基的結(jié)合，從而在一定程度上抑制肽鍵的形成。
殺稻瘟菌素S具有快速而強(qiáng)效的作用模式，很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。它不僅對(duì)細(xì)菌和真核生物中的蛋白質(zhì)合成有顯著抑制作用，還對(duì)真菌、線蟲(chóng)和腫瘤細(xì)胞也具有活性。殺稻瘟菌素S常用于篩選攜帶bsr或BSD基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
殺稻瘟菌素S的應(yīng)用
哺乳動(dòng)物細(xì)胞：殺稻瘟菌素S常用于篩選攜帶bsr或BSD基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。這些抗性基因分別來(lái)自蠟樣芽孢桿菌和土曲霉，能夠?qū)⒌疚辆剞D(zhuǎn)化為無(wú)毒的衍生物，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)未攜帶抗性基因細(xì)胞的選擇性殺死，哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/mL。
細(xì)胞 | 種屬 | 組織 | 培養(yǎng)基 | Blasticidin S濃度 (μg/mL) |
HeLa 人類子宮細(xì)胞 | Human | Uterus | DMEM | 3-10 |
HEK293 人類胚胎腎細(xì)胞 | Human | Kidney | DMEM | 3-10 |
B16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 | Mouse | Melanoma | RPMI | 3-10 |
PC1.0 敘利亞倉(cāng)鼠腺癌細(xì)胞 | Hamster | Adenocarcinoma | RPMI | 10-30 |
CHO 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 | Hamster | Ovary | DMEM | 5-15 |
細(xì)菌選擇：在細(xì)菌培養(yǎng)中，推薦使用濃度為25-100 µg/mL，可以迅速導(dǎo)致未攜帶抗性基因的細(xì)胞死亡。
E. coli對(duì)Blasticidin S的敏感性稍差，但是轉(zhuǎn)化子對(duì)Blasticidin S具有耐受性，可以用低鹽LB培養(yǎng)基（pH 8）進(jìn)行篩選，濃度范圍為50-100 μg/mL Blasticidin S，高pH值可以提高Blasticidin S的活性。
植物細(xì)胞：同樣適用于植物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，常用bsr和BSD作為篩選標(biāo)志。
殺稻瘟菌素S被用于研究肽鍵形成水平上的蛋白質(zhì)合成過(guò)程，特別是在TLR-2構(gòu)建體的HEK293-T細(xì)胞和HEK-D5細(xì)胞中的應(yīng)用。
它還具有一定的抗真菌活性，可用于預(yù)防和治療稻瘟病。其殺菌作用主要是影響蛋白質(zhì)的合成，并且能夠抑制孢子萌發(fā)、菌絲發(fā)育和孢子形成。
殺稻瘟菌素S也被用于研究腫瘤細(xì)胞的抑制效果。
它還可以作為含有抗性基因bls、bsr或BSD的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的選擇劑。
稻瘟菌素S的相關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟（哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選）
1）Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/mL。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，在含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中孵育，用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
2）轉(zhuǎn)染后48 h，用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代（注：細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作最好。細(xì)胞密度太高，抗生素效率降低。細(xì)胞分盤時(shí)覆蓋率最好不超過(guò)25%）。
3）每3-4天去除培養(yǎng)基，加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基。
4）7天后檢測(cè)細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類和轉(zhuǎn)染/篩選效率，集落形成可能需要增加一周或更久。
5）轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35 mm細(xì)胞盤中，加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。
產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 外觀 | 價(jià)格（元） |
Blasticidin S 殺稻瘟菌素S 滅瘟素 CAS：3513-03-9 | 60218ES10 | 10 mg | 液體（濃度為10 mg/mL，in HEPES緩沖液，pH 7.5） | 688 |
60218ES50 | 5×10 mg | 2446 | ||
60218ES60 | 10×10 mg | 4483 | ||
60218ES80 | 1 g | 粉末（使用時(shí)可用無(wú)菌水或者緩沖液配制成5-10 mg/mL的儲(chǔ)存液） | 22595 |
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素鹽酸鹽 | 60210ES25/60 | 25 /100 mg | 678/2028 |
鹽酸博萊霉素 | 60216ES60/80 | 100/10×100 mg | 453/3353 |
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素 | 60217ES20/60 | 20/5×20 mg | 868/3268 |
Blasticidin S (10mg/ml in Solution) 殺稻瘟菌素S （滅瘟素） | 60218ES10/50/60/80 | 10/5×10/10×10 mg/1 g | 688/2446/4483/22595 |
G418 Sulfate (Geneticin) 遺傳霉素 | 60220ES03/08 | 1/5 g | 358/1480 |
Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B （50 mg/ml） | 60224ES03 | 1 g (20 ml) | 849 |
Hygromycin B 潮霉素B | 60225ES03/10 | 1/10 g | 719 /6599 |
金擔(dān)子素A（AbA） | 60231ES03/08 | 1/5×1 mg | 1366/4266 |
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Penicillin-Streptomycin (100×), Suitable for Cell Culture 細(xì)胞培養(yǎng)用青霉素-鏈霉素（雙抗） | 60162ES76 | 100 mL | 158 |
環(huán)丙沙星鹽酸鹽 | 60201ES25/60 | 25/100 g | 198/588 |
Carbenicillin, Disodium Salt | 60202ES08/25 | 5/25 g | 358/1428 |
Ampicillin, Sodium Salt 氨芐青霉素鈉 | 60203ES10/60 | 10/100 g | 108/968 |
Doxycycline hyclate 鹽酸強(qiáng)力霉素 | 60204ES03/08 | 1/5 g | 106/445 |
Chloramphenicol, USP Grade 氯霉素，USP級(jí) | 60205ES08/25 | 5/25 g | 48/208 |
Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 | 60206ES10/60 | 10/100 g | 169/1436 |
Neomycin Sulfate 硫酸新霉素 | 60207ES25/60 | 25/100 g | 148/488 |
Penicillin G, Sodium Salt ?青霉素G鈉鹽 | 60208ES25/60 | 25/100 g | 289/1049 |
Streptomycin Sulfate 硫酸鏈霉素 | 60211ES25/60 | 25/100 g | 119/339 |
Tetracyclin HCl 四環(huán)素鹽酸鹽（USP） | 60212ES25/60 | 25/100 g | 168/678 |
Vancomycin Hydrochloride 鹽酸萬(wàn)古霉素 | 60213ES60/80 | 100 mg/1 g | 287/677 |
Gentamycin Sulfate Salt ?硫酸慶大霉素 | 60214ES03/08 | 1/5 g | 349/1150 |
Spectinomycin Hydrochloride 鹽酸壯觀霉素 | 60215ES08 | 5 g | 479 |
Cefotaxime Sodium Salt 噻孢霉素鈉鹽 | 60226ES03/08 | 1/5 g | 102/325 |
Rifampicin 利福平 | 60234ES03/08 | 1/5 g | 159/579 |
Amphotericin B 兩性霉素B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 g | 479/3349 |
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