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上新 | 多樣本適用,16S擴(kuò)增子建庫(kù)利器來(lái)襲!

2024-10-15  閱讀(111)

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微生物群落多樣主要包括物種多樣性、遺傳多樣性和功能多樣性3個(gè)方面,在環(huán)境、能源、食品與人體健康等諸多領(lǐng)域有著廣泛的研究與應(yīng)用。16SrRNA擴(kuò)增子測(cè)序技術(shù)是微生物群落多樣性檢測(cè)常用的組學(xué)技術(shù)之一,該技術(shù)無(wú)需對(duì)微生物分離培養(yǎng),直接提取樣本里面所有微生物的基因組,利用合適的通用引物擴(kuò)增16S rDNA/18S rDNA /ITS等高變區(qū)或功能基因,采用高通量測(cè)序儀Miseq、Hiseq或Novaseq對(duì)其進(jìn)行測(cè)序,通過(guò)生物信息學(xué)分析可以獲得特定實(shí)驗(yàn)樣品中細(xì)菌、真菌或古菌等的物種組成、物種豐度、系統(tǒng)進(jìn)化、群落比較等諸多信息。

 

 
01

16S rDNA測(cè)序

16S rDNA為編碼原核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列,具有10個(gè)保守區(qū)域和9個(gè)可變區(qū)域,其中保守區(qū)在細(xì)菌間差異不大(反映了生物物種間的親緣關(guān)系),可變區(qū)具有屬或種的特異性。對(duì)16S rDNA某個(gè)可變區(qū)進(jìn)行測(cè)序,可用于研究微生物中細(xì)菌或古菌的群落結(jié)構(gòu)多樣性。

 

原核微生物的16S rRNA基因長(zhǎng)度約為1500 bp,二代測(cè)序平臺(tái)對(duì)應(yīng)擴(kuò)增引物一般選用V3-V4區(qū)域或V4區(qū)域,三代測(cè)序平臺(tái)可選用全長(zhǎng)擴(kuò)增引物(27F/1492R)。

 

圖1. 16S rDNA基因序列組成示意圖
(藍(lán)色為可變區(qū),白色為保守區(qū))

02

18S rDNA測(cè)序

18S rDNA為編碼真核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列。對(duì) 18S rDNA某個(gè)高變區(qū)進(jìn)行測(cè)序,用于研究環(huán)境樣本中真核微生物群落結(jié)構(gòu)多樣性。

 

真核微生物18S rRNA基因長(zhǎng)度1500-2000 bp,引物一般選用V4區(qū)域。

 

圖2. 18S rDNA基因序列組成示意圖
(藍(lán)色為可變區(qū),白色為保守區(qū))

03

ITS測(cè)序

ITS分為兩個(gè)區(qū)域:ITS1和 ITS2,ITS1位于真核生物rDNA序列18S和 5.8S之間,ITS2位于真核生物rDNA序列5.8S和28S之間。對(duì)ITS1(350 bp)或ITS2(400 bp)進(jìn)行測(cè)序,用于研究環(huán)境微生物中真菌群落結(jié)構(gòu)多樣性。

 

ITS區(qū)長(zhǎng)度則為400-900 bp,引物一般選用ITS1區(qū)域。

圖3. ITS rDNA基因序列組成示意圖
(藍(lán)色為可變區(qū),白色為保守區(qū))
04

宏條形碼測(cè)序

DNA條形碼(DNA barcode)是可以代表物種的、有足夠變異的、易擴(kuò)增且相對(duì)較短的生物DNA片段。宏條形碼技術(shù)結(jié)合了DNA條形碼和高通量測(cè)序技術(shù)的優(yōu)勢(shì),使用特異性引物對(duì)目標(biāo)生物類群的基因進(jìn)行擴(kuò)增,并通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)增加測(cè)序深度,從而增加對(duì)環(huán)境DNA的覆蓋度和識(shí)別度。
05

目標(biāo)區(qū)域擴(kuò)增子測(cè)序

利用二代高通量測(cè)序技術(shù),對(duì)某些目標(biāo)基因(如產(chǎn)甲烷古菌,固氮菌等)的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序及分析。

 

 

產(chǎn)品介紹

01

16S rDNA文庫(kù)建庫(kù)試劑盒利用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)16S rDNA中V3-V4或V4區(qū)片段進(jìn)行擴(kuò)增,結(jié)合生物信息學(xué)技術(shù),檢測(cè)特定環(huán)境下的微生物,鑒定所檢細(xì)菌種類,提供環(huán)境樣本物種分類、物種豐度、種群結(jié)構(gòu)、系統(tǒng)進(jìn)化等諸多信息。試劑盒中包含進(jìn)行細(xì)菌16S rDNA擴(kuò)增的所有試劑、16S PCR擴(kuò)增引物F/R,組合Illumina 和MGI平臺(tái) Index 引物試劑盒用于16S rDNA片段的擴(kuò)增。

 

 

 

產(chǎn)品應(yīng)用

02
  • 科學(xué)研究:進(jìn)行微生物群落結(jié)構(gòu)和功能研究;

  • 臨床監(jiān)測(cè):用于疾病診斷、感染控制和治療監(jiān)測(cè);

  • 環(huán)境監(jiān)測(cè):評(píng)估環(huán)境樣本中的微生物多樣性和污染情況;

  • 農(nóng)業(yè)研究:研究土壤微生物群落對(duì)作物生長(zhǎng)的影響;

  • 能源領(lǐng)域:特殊功能的菌株、基因挖掘、工程菌的開(kāi)發(fā);

  • 食品相關(guān)監(jiān)測(cè):檢測(cè)和控制食品中的微生物污染。

 

 

產(chǎn)品特點(diǎn)

03
  • 適用多樣本類型:兼容大多數(shù)常見(jiàn)環(huán)境樣本,如土壤、糞便、水體、生物膜等;

  • 高效率擴(kuò)增:靈敏度低至0.1 ng,特異性優(yōu),均一性好;

  • 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量高:低背景、高覆蓋度、高均一性。

 

 

性能展示

04

 

 

產(chǎn)品信息

05

應(yīng)用方向

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

提取試劑盒

MolPure® Mag Soil/Stool DNA Kit 磁珠法土壤/糞便DNA提取試劑盒

18526ES20

20 T

18526ES50

50 T

16S rDNA鑒定

 

16S(V3-V4)Bacterial AmpSeq Prep Kit ForIllumina

12983ES08

8 T

12983ES24

24 T

12983ES96

96 T

16S(V4)Bacterial Metagenomic Library Construction Kit For MGI

12933ES08

8 T

12933ES24

24 T

12933ES96

96 T

16S/18S/ITS/宏條形碼/功能基因擴(kuò)增子等

2×Hieff NGS® HG MμLtiplex PCR Master Mix

13283ES03

1 mL

13283ES08

5×1mL

16S 全長(zhǎng)多重?cái)U(kuò)增試劑

2×Hieff® Ultra-Long PCR Master Mix

10158ES03

1 mL

 

 


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