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*0 Chemically Competent Cell
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 產(chǎn)品型號
- 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：881更新時間：2023-03-15 09:16:13
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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品介紹
*0 Chemically Competent Cell
（*0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞）
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
*0 Chemically Competent Cell （*0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞） | 11801ES76 | 100 μl×5管 | -80℃ | 110.00 |
11801ES80 | 100 μl×10管 | -80℃ | 180.00 |
產(chǎn)品描述
本品是采用大腸桿菌*0菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。本品使用pUC19質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108 cfu/μg，廣泛適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增，能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳。
*感受態(tài)細(xì)胞基因型：F-mcrA△(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15△lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Strr) endA1 nupG。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
11801ES76（100 μl × 5管） | 11801ES80（100 μl × 10管） | ||
11801-A | *0感受態(tài)細(xì)胞 | 100 μl × 5 | 100 μl × 10 |
11801-B | pUC19（0.1 ng/μl） | 10 μl | 10 μl |
使用方法
- 取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
注：一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實際情況分裝使用，應(yīng)注意所用的DNA體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
- 向100 μl感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA，輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30min。
- 將離心管置于42℃水浴中放置60-90s，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3min，該過程不要搖動離心管。
- 向離心管中加入900μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)45 min（150 rpm），目的是促使菌體復(fù)蘇，抗性基因表達(dá)。
- 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100μl已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開。室溫正置10 min，待液體被吸收后，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 h。
注：涂布菌液多少可根據(jù)轉(zhuǎn)化DNA量來調(diào)整。如果預(yù)計的克隆較少，可通過離心后吸除部分培養(yǎng)液，重新懸浮菌體后將其涂布在一個平板上。剩余菌液可置于4℃保存，一周之內(nèi)可重新涂板。
運(yùn)輸與保存方法
干冰運(yùn)輸。
*0感受態(tài)細(xì)胞-80℃保存，pUC19質(zhì)粒-20℃保存。有效期半年。
注意事項
感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-80℃，不可反復(fù)凍融和放置時間過長，以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率
