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參考價(jià): | 面議 |
- 20542ES08 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
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DEAE弱陰離子交換樹(shù)脂以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖為介質(zhì),可耐受較高的流速及更高的化學(xué)穩(wěn)定性,適合實(shí)驗(yàn)室及工業(yè)大規(guī)模純化,離子交換基團(tuán)-O-CH2CH2-N (C2H5)2。
HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML
HiSep DEAE弱陰離子純化預(yù)裝柱,5ML
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格(元) |
HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML HiSep DEAE弱陰離子純化預(yù)裝柱,5ML | 20542ES08 | 5ml | 4℃ | 528.00 |
產(chǎn)品描述
離子交換樹(shù)脂主要包括強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、弱酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂和弱堿性陰離子交換樹(shù)脂4種,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的分離純化。
DEAE弱陰離子交換樹(shù)脂以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖為介質(zhì),可耐受較高的流速及更高的化學(xué)穩(wěn)定性,適合實(shí)驗(yàn)室及工業(yè)大規(guī)模純化,離子交換基團(tuán)-O-CH2CH2-N (C2H5)2。
本品HiSep DEAE弱陰離子純化預(yù)裝柱是一種以DEAE弱陰離子交換樹(shù)脂為填料的中壓預(yù)裝柱,規(guī)格為5ml,該預(yù)裝柱具有標(biāo)準(zhǔn)接口,可以適配商品化的各類中壓色譜系統(tǒng),如ÄKTA等,方便客戶操作。
產(chǎn)品性質(zhì)
基質(zhì)(Matrix) | 高度交聯(lián)的6%瓊脂糖微球 |
粒徑(Bead size) | 45-165µm |
離子交換類型(Type) | 弱陰離子 |
載量(Capacity) | ~0.11-0.16mmol Cl-/ml 基質(zhì) |
流速(Flow Rate) | 300-600cm/h |
pH范圍(pH Range) | 2-12 |
儲(chǔ)存緩沖液(Buffer) | 20%乙醇 |
柱子尺寸(Column Size) | 1.65×2.7cm(5ml) |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。4℃保存,有效期2年。
使用方法
1 緩沖液的準(zhǔn)備
所用水和Buffer在使用前用0.22µm或0.45µm濾膜過(guò)濾。
2 樣品準(zhǔn)備
樣品在使用前用0.22µm或0.45µm濾膜過(guò)濾,減少雜質(zhì),提高蛋白純化效率和防止堵塞柱子。
3 樣品純化
1)將泵管道中注滿去離子水。去掉上塞子,將層析柱連接至色譜系統(tǒng)中。再折斷下口, 將預(yù)裝柱接到色譜系統(tǒng)中,并旋緊。
2)用3-5倍柱體積的去離子水沖洗出存儲(chǔ)緩沖液。
3)使用至少5倍柱床體積的結(jié)合Buffer平衡色譜柱,推薦流速為5ml/min。
4)利用泵或注射器上樣。
【注】:樣品的粘度增加使得即使上樣體積很少也會(huì)導(dǎo)致層析柱很大的反壓。上樣量不要超過(guò)柱子的結(jié)合能力。大量的樣品體積也可能造成很大的反壓,使得進(jìn)樣器更難使用。
5)用洗雜Buffer沖洗柱子,直到紫外吸收達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定的基線(一般至少10-15個(gè)柱體積)。
6)用洗脫Buffer 采用一步法或線性梯度洗脫。一步洗脫中,通常5倍柱體積洗脫液就足夠了??梢杂靡粋€(gè)小的梯度,例如 20 倍柱體積或更多,來(lái)分離不同結(jié)合強(qiáng)度的蛋白質(zhì)。
4 SDS-PAGE 檢測(cè)
將得到的樣品(包括流出組分、洗雜組分和洗脫組分)以及原始樣品使用SDS-PAGE 檢測(cè)純化效果。
5 填料清洗
離子交換樹(shù)脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高離子強(qiáng)度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱體積的Buffer 進(jìn)行平衡至離子強(qiáng)度或pH值穩(wěn)定。
CIP(Cleaning In Place)清洗
離子交換樹(shù)脂可以重復(fù)使用而無(wú)需再生,但隨著非特異性結(jié)合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和結(jié)合載量都下降,這時(shí)可按照下面方法對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行清洗。
1)去除一些沉淀或變性物質(zhì)
用2倍柱體積的1M NaOH 溶液進(jìn)行清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS, pH7.4清洗。
2)去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì)
用3-4倍柱體積的70%乙醇或3-4倍柱體積的1% Triton™ X-100 清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS, pH7.4清洗。
3)去除一些離子鍵結(jié)合物質(zhì)
用3-4倍柱體積的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS, pH 7.4清洗。
注意事項(xiàng)
1)請(qǐng)勿冷凍保存本產(chǎn)品。
2)Resin使用前一定要充分顛倒若干次,使瓊脂糖珠混合均勻。
3)所有操作過(guò)程中,樣本需要在4℃或冰上操作。
4)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
附表 問(wèn)題及解決方案
問(wèn)題 | 可能原因 | 推薦解決方案 |
柱子反壓過(guò)高 | 填料被堵塞 | 按照【填料清洗】部分對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行清洗。 |
樣品中含有微小的固體顆粒,建議使用前用0.22µm或0.45µm濾膜過(guò)濾。 | ||
洗脫樣品較雜 | 樹(shù)脂重復(fù)多次使用 | 按照【填料清洗】部分對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行清洗或更換新樹(shù)脂。 |
平衡不充分 | 增加平衡液體積,確保樹(shù)脂充分平衡/洗雜。 |
相關(guān)產(chǎn)品
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20541ES03 | HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 1ML(HiSep DEAE弱陰離子純化預(yù)裝柱,1ML) | 1ml | 138.00 |
20542ES08 | HiSep DEAE 6FF Chromatography Column, 5ML(HiSep DEAE弱陰離子純化預(yù)裝柱,5ML) | 5ml | 528.00 |