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12601ES03Hieff NGS™ DNA分選磁珠
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 12601ES03 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):2637更新時間:2022-03-21 16:24:48

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1ml
貨號 12601ES03 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
Hieff NGS DNA分選磁珠基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理,配合精心優(yōu)化過的緩沖體系,可用于二代測序文庫構(gòu)建過程中的DN片段分選、純化。本產(chǎn)品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫試劑盒,和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同.
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分選磁珠

12601ES03

1 mL

296.00

12601ES08

5 mL

986.00

12601ES56

60 mL

6286.00

12601ES75

450 mL

26186.00

產(chǎn)品描述

Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理,配合精心優(yōu)化過的緩沖體系,可用于二代測序文庫構(gòu)建過程中的DNA段分選、純化。本產(chǎn)品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫試劑盒,和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同,片段回收效率和文庫大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。

運輸與保存方法

冰袋運輸。2-8℃保存,效期一年。避免冷凍!

注意事項

1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2)磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。

3)80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配,否則將影響回收效率。

4)進行長度分選時,初始樣品體積需≥100μL,不足時請用超純水補齊。樣品體積太小,將導(dǎo)致移液誤差增大,進而影響分選的準確性。

5) 本產(chǎn)品僅用作科研用途!

使用方法

1. 準備工作

將磁珠由冰箱中取出,室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。

2. 長度分選(雙輪法)

長度分選操作流程如1所示,具體操作如下。


圖1雙輪分選操作流程.jpg


1雙輪分選操作流程

1)請渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證混勻。

2)根據(jù)要求,參考1DNA溶液中加入第一輪分選磁珠,渦旋混勻或移液器吹打10次混勻。

3)室溫孵育5 min。

4)將離心管短暫離心并置于磁力架中,待溶液澄清后(約5 min),小心轉(zhuǎn)移上清到干凈的離心管中。

注意:轉(zhuǎn)移上清時,請殘留2 μL液體于管底,切勿全部吸出上清,避免吸到磁珠并影響分選效果。

舉例:當初始體積為100 μL,第一輪使用0.8×比例,即加入80 μL磁珠,推薦吸出178 μL的上清。

5)參考1向上清中加入第二輪分選磁珠。

6)渦旋混勻或移液器吹打10次混勻,室溫靜置5 min。

7)將離心管短暫離心并置于磁力架中,待溶液澄清后(約5 min),小心移除上清。

8)保持離心管始終處于磁力架中,加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠,室溫孵育30 s,小心移除上清。

9)重復(fù)步驟8。

10)保持離心管始終處于磁力架中,開蓋干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂(約5 min)。

注意:切記磁珠不要干燥時間太久,磁珠干燥過度將影響純化效果。

11)將離心管從磁力架中取出,加入適量ddH2O(≥20 μL),渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打充分混勻,室溫孵育5 min。

12)將離心管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清后(約5 min),小心吸取上清至干凈的管中,即完成分選。

3. DN片段分選參考條件

通過超聲法將小牛胸腺DNA進行片段化,制備100-1000 bp的Smear片段,根據(jù)表1進行雙輪分選。結(jié)果使用Agilent 2100 Bioanalyzer進行分析(2)。

1磁珠文庫分選推薦比例

DN片段大小

250-350 bp

320-420 bp

450-550 bp

550-700 bp

700-900 bp

800-1000 bp

第一輪體積比(Beads:DNA)

0.80×

0.70×

0.60×

0.55×

0.50×

0.45×

第二輪體積比(Beads:DNA)

0.20×

0.20×

0.20×

0.15×

0.15×

0.15×

注:表中“×"表示樣品DNA體積。如文庫插入片段長度為250 bp,樣品DNA體積為100mL,則第一輪分選磁珠使用體積為0.80×100 mL=80 mL;第二輪分選磁珠使用體積為0.20×100 mL=20 mL。


圖 2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram.png

2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram

Smear fragments溶于ddH2O,使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠進行片段分選

HB211123




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