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參考價: | 面議 |
- 12601ES03 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):2637更新時間:2022-03-21 16:24:48
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ml |
---|---|---|---|
貨號 | 12601ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分選磁珠 | 12601ES03 | 1 mL | 296.00 |
12601ES08 | 5 mL | 986.00 | |
12601ES56 | 60 mL | 6286.00 | |
12601ES75 | 450 mL | 26186.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理,配合精心優(yōu)化過的緩沖體系,可用于二代測序文庫構(gòu)建過程中的DNA段分選、純化。本產(chǎn)品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫試劑盒,和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同,片段回收效率和文庫大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。
運輸與保存方法
冰袋運輸。2-8℃保存,效期一年。避免冷凍!
注意事項
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。
3)80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配,否則將影響回收效率。
4)進行長度分選時,初始樣品體積需≥100μL,不足時請用超純水補齊。樣品體積太小,將導(dǎo)致移液誤差增大,進而影響分選的準確性。
5) 本產(chǎn)品僅用作科研用途!
使用方法
1. 準備工作
將磁珠由冰箱中取出,室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。
2. 長度分選(雙輪法)
長度分選操作流程如圖1所示,具體操作如下。
圖1雙輪分選操作流程
1)請渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證混勻。
2)根據(jù)要求,參考表1向DNA溶液中加入第一輪分選磁珠,渦旋混勻或移液器吹打10次混勻。
3)室溫孵育5 min。
4)將離心管短暫離心并置于磁力架中,待溶液澄清后(約5 min),小心轉(zhuǎn)移上清到干凈的離心管中。
注意:轉(zhuǎn)移上清時,請殘留2 μL液體于管底,切勿全部吸出上清,避免吸到磁珠并影響分選效果。
舉例:當初始體積為100 μL,第一輪使用0.8×比例,即加入80 μL磁珠,推薦吸出178 μL的上清。
5)參考表1向上清中加入第二輪分選磁珠。
6)渦旋混勻或移液器吹打10次混勻,室溫靜置5 min。
7)將離心管短暫離心并置于磁力架中,待溶液澄清后(約5 min),小心移除上清。
8)保持離心管始終處于磁力架中,加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠,室溫孵育30 s,小心移除上清。
9)重復(fù)步驟8。
10)保持離心管始終處于磁力架中,開蓋干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂(約5 min)。
注意:切記磁珠不要干燥時間太久,磁珠干燥過度將影響純化效果。
11)將離心管從磁力架中取出,加入適量ddH2O(≥20 μL),渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打充分混勻,室溫孵育5 min。
12)將離心管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清后(約5 min),小心吸取上清至干凈的管中,即完成分選。
3. DN片段分選參考條件
通過超聲法將小牛胸腺DNA進行片段化,制備100-1000 bp的Smear片段,根據(jù)表1進行雙輪分選。結(jié)果使用Agilent 2100 Bioanalyzer進行分析(圖2)。
表1磁珠文庫分選推薦比例
DN片段大小 | 250-350 bp | 320-420 bp | 450-550 bp | 550-700 bp | 700-900 bp | 800-1000 bp |
第一輪體積比(Beads:DNA) | 0.80× | 0.70× | 0.60× | 0.55× | 0.50× | 0.45× |
第二輪體積比(Beads:DNA) | 0.20× | 0.20× | 0.20× | 0.15× | 0.15× | 0.15× |
注:表中“×"表示樣品DNA體積。如文庫插入片段長度為250 bp,樣品DNA體積為100mL,則第一輪分選磁珠使用體積為0.80×100 mL=80 mL;第二輪分選磁珠使用體積為0.20×100 mL=20 mL。
圖2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
Smear fragments溶于ddH2O,使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠進行片段分選
HB211123