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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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13283ES032×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 13283ES03 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：424更新時(shí)間：2023-03-15 09:46:15
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ML |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 13283ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
HB191218
2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix
2×高GC多重PCR預(yù)混液
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix 2×高GC多重PCR預(yù)混液 | 13283ES03 | 1 mL |
13283ES08 | 5×1 mL | |
13283ES50 | 50 mL | |
13283ES60 | 250 mL | |
13283ES76 | 500 mL |
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品適用于多重PCR實(shí)驗(yàn)。2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix以熱啟動(dòng)多重PCR酶制劑與2×擴(kuò)增緩沖液為組分配置成預(yù)混液。本預(yù)混液可兼容GC含量在25%-70%左右的多重基因擴(kuò)增，快速便捷地用于多重PCR反應(yīng)，具備高均一性、高特異性和高靈敏度的特點(diǎn)。本試劑適用于不同多重PCR需求，可用于凝膠電泳鑒定20對(duì)以內(nèi)不同大小片段的多重產(chǎn)物，也可用于進(jìn)行數(shù)百重及以上擴(kuò)增子的富集。
運(yùn)輸與保存方式
冰袋運(yùn)輸。-20℃儲(chǔ)存，有效期1年。
參考反應(yīng)體系
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix | 15 | 1× |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | 1 ng-400 ng | - |
無菌超純水 | up to 30 | - |
【注】
1）上表中DNA量和引物濃度均為推薦用量和濃度，可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)整適濃度。
2）參考建議：每條引物的濃度可在0.1 μM-0.5 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。
3）預(yù)混液中已經(jīng)包含擴(kuò)增所需要的酶、dNTP、鹽離子等，無需額外添加。
第—輪擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度（℃） | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 3 min | 1 |
變性 | 95℃ |
| 15-45 |
退火延伸 | 60℃ | 4-10 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】 在PCR儀上設(shè)置上表中的反應(yīng)程序進(jìn)行多重PCR反應(yīng)（設(shè)置熱蓋溫度至105℃左右）。
退火延伸時(shí)間：100重PCR推薦4 min；1000重推薦8-10 min需要自己根據(jù)引物情況摸索。
PCR產(chǎn)物磁珠純化: 建議在30 μL 反應(yīng)體系中加27μL磁珠（Cat:12601）進(jìn)行產(chǎn)物純化。
第二輪擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度（℃） | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 3 min | 1 |
變性 | 95℃ |
| 15-45 |
退火 | 60℃ | 1 min | |
延伸 | 72℃ | 30 sec |
|
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】：退火溫度和時(shí)間：推薦使用60℃，也可根據(jù)需要，設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的適溫度。推薦退火時(shí)間設(shè)置為1 min，可以在30 s-1 min內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時(shí)間太長(zhǎng)可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。
PCR產(chǎn)物磁珠純化
建議在30 μL 反應(yīng)體系中加27μL磁珠（Cat:12601）進(jìn)行產(chǎn)物純化。
