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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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11300ES92Hifair® V Reverse Transcriptase
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 11300ES92 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：357更新時(shí)間：2022-02-09 15:59:12
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10000 U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11300ES92 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11300ES92 | 10000 U | 1623.00 |
Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11300ES93 | 50000 U | 5623.00 |
產(chǎn)品描述
Hifair® V Reverse Transcriptase是在Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基礎(chǔ)上通過基因工程技術(shù)得到的全新逆轉(zhuǎn)錄酶，與Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比，其熱穩(wěn)定性大幅度提高，可耐受高達(dá)60℃的反應(yīng)溫度，適合具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。同時(shí)，該酶增強(qiáng)了與模板的親和力，適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。Hifair® V Reverse Transcriptase合成全長cDNA的能力也有了提升，可擴(kuò)增長達(dá)10 kb的cDNA。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
11300ES92 (10000 U) | 11300ES93 (50000 U) | ||
11300-A | Hifair® V Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
11300-B | 5×Hifair® V Buffer | 250 μL | 1.25 mL |
產(chǎn)品應(yīng)用
一步法RT-qPCR；基因克隆；熒光定量。
活性定義
以Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物，在37℃，10 min內(nèi)，將1 nmol的dTTP摻入為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個活性單位（U）。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測：200 U本酶和1 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育1 h，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
核酸內(nèi)切酶殘留檢測：200 U本酶和1 μg Supercoiled pBR322 DNA，37℃下孵育1 h，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
RNase殘留檢測：200 U本酶和1 μg小鼠肝臟總RNA，37℃下孵育1 h，RNA電泳譜帶不發(fā)生變化。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期2年。
注意事項(xiàng)
1）請保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈；操作時(shí)需穿戴干凈的手套、口罩；實(shí)驗(yàn)所用耗材均需保證RNase free，以防止RNase污染；
2）所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行，防止RNA降解；
3）為保證高效率逆轉(zhuǎn)錄，建議使用高質(zhì)量的RNA樣本；
4）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
第—鏈cDNA合成操作步驟
1. RNA變性（此步為可選步驟，RNA變性有助于打開二級結(jié)構(gòu)，可在很大程度上提高第—鏈cDNA的產(chǎn)量。）
組分 | 使用量 |
RNase free ddH2O | to 13 μL |
Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers (50 μM) or Gene Specific Primers (2 μM) | 1 μL |
or 1 μL | |
or 1 μL | |
模板RNA | Total RNA: 1 ng -5 μg或mRNA:1 ng-500 ng |
65℃加熱5 min，迅速置于冰上冷卻2 min。簡短離心收集反應(yīng)液后，加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液，并輕輕吹打混勻。
2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制（20 μL體系）
組分 | 使用量 |
上一步的反應(yīng)液 | 13 μL |
5×Hifair® V Buffer | 4 μL |
dNTP Mix (10 mM) | 1 μL |
Hifair® V Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 1 μL |
RNase inhibitor (40 U/µL) | 1 μL |
3. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置
溫度 | 時(shí)間 |
25℃ | 5 min |
42℃ | 15-30 min |
85℃ | 5 min |
【注】：1）當(dāng)使用Random Primers時(shí)，需25℃，孵育5 min；若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers，此步可省略。
2）逆轉(zhuǎn)錄溫度：推薦使用42℃。對于高GC含量模板或者復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的模板，可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高至50-55℃。
3）85℃加熱5 min，目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。
※ 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng)，也可-20℃短期保存，若需長期保存，建議分裝后，于-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES05/10 | 2/10 KU | 216/916 |
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase（配體法熱啟動DNA聚合酶） | 10110ES72/80 | 250/1000 U | 186/636 |
Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase（抗體法熱啟動Taq酶） | 10113ES60/76 | 100/500 U | 216/656 |
Hieff Unicon® qPCR TaqMan Probe Master Mix | 11205ES08 | 5 mL | 740 |
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix | 11208ES08 | 5 mL | 5565 |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 熱敏UDG | 10303ES60/76 | 100/500 U | 683/3083 |
dUTP, 100mM Solution 脫氧尿苷三磷酸溶液（100 mM） | 10128ES72/80 | 0.25/1 mL | 253/853 |
dNTP Mix (25 mM each) | 10125ES72/80 | 0.25/1 mL | 116/353 |
HB200122
