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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

翌圣 PET2迷你垂直電泳槽操作手冊可運行市場多個品牌的預(yù)制膠和手灌膠，最多可2塊凝膠同時運行；兼容1-D垂直和2-D雙向電泳應(yīng)用。配件齊全，滿足制膠及電泳所有環(huán)節(jié)，也使得手灌膠變得簡便快捷。

結(jié)構(gòu)信息

操作指南

1. 凝膠版準備：

1) 正確放置保證灌膠框水平于操作臺上，并打開灌膠框手柄；按所需凝膠厚度選擇邊條玻璃板，將短玻璃放置其上；帶邊條玻璃板的標記端向上，將兩塊玻璃板滑入灌膠框與水平定位結(jié)構(gòu)（紅圈）對齊，使短玻璃板一面朝向前方（圖1，A）?！咀ⅰ浚捍_認標記方向正確；玻璃板方向錯誤或者未對齊會造成漏膠。

2) 玻璃板到位后關(guān)閉灌膠框手柄，將玻璃板夾緊在灌膠框中，并檢查玻璃板底部是否平齊（圖1，B）。

3) 保持灌膠框手柄關(guān)閉，將灌膠框放置于制膠底座的制膠密封墊上。同時將凸輪杠桿壓在帶邊條的玻璃板上（圖1，C）。

4) 重復(fù)上述步驟可制作另一塊膠板。

                                    A                                                                                        B                                                                C

圖1 凝膠板準備

2. 灌膠：

不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠

1) 預(yù)先可將梳子*放入組合好的凝膠夾中，在梳齒下端 1 cm處作標記。用來粗略估計分離膠添加高度；

2) 混合所有試劑來制作分離膠單體溶液。將溶液注入玻璃板之間至標記處。注入溶液時須平穩(wěn)以防止其與空氣混合；立即以水或者異丙醇覆蓋溶液表面。注意：如果用水覆蓋須小心緩慢平穩(wěn)加入以防與溶液混合；

3) 放置45 min到1 h使凝膠聚合（或者根據(jù)不同品牌的配膠試劑盒要求，進行判斷凝膠情況）。可用雙蒸水*清洗凝膠表面。不要讓醇類物質(zhì)在膠上超過1小時以防止上部凝膠脫水；

4) 準備濃縮膠單體溶液。注入濃縮膠溶液前用濾紙使分離膠表面干燥；將溶液注入玻璃板之間直至與短玻璃板平齊；在邊條之間從上部插入所需的梳子，確認梳子兩端突起在邊條之間引導(dǎo)，*插入直至梳子背脊與短玻璃板對齊；

5) 放置30-45 min使?jié)饪s膠聚合（或者根據(jù)不同品牌的配膠試劑盒要求，進行判斷凝膠情況）；

6) 輕輕取出梳子并以蒸餾水或緩沖液*清洗凝膠表面。以蒸餾水，去離子水清洗用過的灌膠架和制膠底座。

連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠

1) 混合所有試劑來制作凝膠單體溶液，將溶液注入玻璃板之間直至與短玻璃板平齊；

2) 在邊條之間從上部插入所需的梳子，確認梳子兩端突起在邊條之間引導(dǎo)。*插入直至梳子背脊與短玻璃板對齊；

3) 放置45 min到1 h使凝膠聚合（或者根據(jù)不同品牌的配膠試劑盒要求，進行判斷凝膠情況）；

4) 輕輕取出梳子并以蒸餾水或緩沖液*清洗凝膠表面；

5) 以蒸餾水，去離子水清洗用過的夾膠框和制膠架。

3. 電泳模塊組裝與上樣所需材料：

1) 準備潔凈干燥的電泳緩沖液槽；電泳芯模塊（1個電泳芯模塊只能用于1或2塊膠，做3或4塊膠需要2個模塊）；電泳緩沖液（1-2塊膠700 mL；3-4塊膠1,000 mL）；

【注】：只運行2塊膠時只需使用電極插頭的電泳芯。運行4塊膠時，電極插頭的電泳芯和蘑菇頭電泳芯均要使用，每個組件2塊膠。

2) 打開灌膠架并放置于干凈平整操作臺上（圖2，A）；

3) 將第一塊凝膠三明治以短玻璃板朝內(nèi)側(cè)放置于凝膠支撐架上，凝膠支撐架模鑄于組件底部且每側(cè)均有兩個。放置第一塊膠時須小心確認夾膠框保持平衡狀態(tài)不會翻倒。在另一側(cè)凝膠支撐架上放置第二塊膠，共有兩塊膠相對中心傾斜；如果運行奇數(shù)膠（1或3塊膠），則須使用緩沖液擋板（圖2，B）；

4) 同時將2塊膠板向中心捏緊，使膠板緊貼密封條，并且需短玻璃板頂住密封條臺階；然后雙手同時向內(nèi)合攏兩側(cè)的邊卡，使其鎖定到位；邊卡會推動膠板使短玻璃板緊貼U型密封條的凹槽，以防止漏液（請確認短玻璃板沒有壓住密封條臺階）（圖2，C）；

5) 此時可以用緩沖液清洗樣品孔和上樣（圖2，D），請不要嘗試在膠板壓住密封條臺階時合攏夾膠框夾；

【注】：只運行1-2塊膠時請不要把蘑菇頭電泳芯放入電泳儀中，那樣做會產(chǎn)生額外的熱，影響電泳分離效果。

4. 蛋白上樣：

1) 向電泳槽中注入電泳緩沖液，外槽至外玻璃板上沿之下，內(nèi)槽加滿；

2) 樣本可在電泳芯被放入電泳儀之前或之后進行；

3) 使用注射器或加樣槍將樣品加入樣品孔中（加樣孔體積可參考附件1）。

【注】：加樣時應(yīng)緩慢使樣品均勻沉降于樣品孔底部。注意不要用針頭或加樣器頭刺破膠孔底部；正極和負極均需注入緩沖液，建議正負極緩沖液的液面等高。

5. 在緩沖液槽中放置電泳模塊：

【注】：所需緩沖液體積：2塊膠700 mL；4塊膠1,000 mL；緩沖液槽具有兩個位置可放置兩個模塊：帶插頭電泳芯在后，蘑菇頭電泳芯在前。

1) 首先把緩沖液槽放置于平整桌面上，使正面（具2-Gels 和4-Gels標記的那一面）朝前。如果方向正確，槽邊緣的紅色標記應(yīng)該在右邊，黑色標記在左邊；

2) 如果只運行2塊膠則只需用帶插頭電泳芯，將其放在后部位置上使得紅色（+）極與槽右側(cè)的紅色標記相對應(yīng)；

3) 如需做4塊膠，除放入帶插頭電泳芯外，還要將蘑菇頭電泳芯放入前部位置。確認兩者的紅色（+）極與槽右側(cè)的紅色標記相對應(yīng)。注意，位置和方向的錯誤會使上蓋無法蓋合；

4) 在緩沖液槽中加入緩沖液至標記位置。

6. 緩沖液槽裝配：

將上蓋蓋在緩沖液槽上。確認顏色標記的插頭與插座相對應(yīng)，插頭、插座的匹配可以使定位準確，上蓋上的障礙物可以防止定位錯誤。注意，緩沖液槽兩側(cè)的尖突出部分應(yīng)該從上蓋的狹縫中穿出，以保證上蓋的正確閉合。此時用拇指持續(xù)用力按壓上蓋，直到壓緊在緩沖液槽上。

7. 電源條件：

1) 將電源插頭認準正負極插入電泳儀電源插孔內(nèi)；

2) 給迷你垂直電泳槽通電開始電泳。恒壓200 V是SDS-PAGE和多數(shù)native PAGE電泳的推薦條件，可以被用于2塊膠和4 塊膠上，不同應(yīng)用其優(yōu)化的電壓條件會不同。在200 V電壓條件下運行SDS-PAGE 大約需要35 min。

8. 凝膠取出：

1) 電泳完成后關(guān)斷電源、拔出電源插頭；

2) 移開上蓋，小心取出電泳芯，倒出電泳緩沖液。為防止緩沖液漏灑，請在打開夾子前倒掉緩沖液；

3) 打開夾子，取出凝膠板；

4) 輕輕分離兩塊玻璃板，從凝膠板中取出凝膠；

5) 采用膠面向下，將膠與玻璃板浸泡在轉(zhuǎn)移緩沖液中，使凝膠與玻璃板分離；

6) 用蒸餾去離子水清洗PET 2迷你垂直電泳槽的電泳芯、緩沖液槽等。

質(zhì)量保證

翌圣 PET 2 迷你垂直電泳槽為用戶提供為期2年的質(zhì)量保證。凡由產(chǎn)品的原料及制作工藝造成的產(chǎn)品缺陷，在產(chǎn)品的質(zhì)量保證期內(nèi)均負責免費維修或更換。

如有下列情況發(fā)生，則產(chǎn)品不在質(zhì)量保證范圍之內(nèi)：

1. 由不正確的操作引起的損壞；

2. 由非我公司人員的維修改造引起的損壞；

3. 一般性易損部件，如：鉑金絲、玻璃板、橡膠墊等；

4. 使用有機溶劑造成的損壞。

附表1蛋白膠每孔最大上樣量

HB220321