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36416ESProtein L 4FF Chromatography Column,5 mL
參考價3528
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 36416ES 型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

規(guī)格
5mL3528元99 件 可售

訪問次數(shù):189更新時間:2023-10-22 20:51:50

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,制藥
天然蛋白L(Protein L)是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來的能和免疫球蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì),分子量為36 KD。本產(chǎn)品使用的是基因改造后的蛋白L ,既保留了與抗體k鏈結(jié)合的特性,同時也不會影響抗體的抗原結(jié)合位點。與 protein A 和 Protein G 相比,Protein L 更能廣泛地結(jié)合各種來源及亞類的抗體,包括人、小鼠、大鼠、兔和雞,但不結(jié)合牛、山羊或綿羊來源的免疫球蛋白。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品簡介

 

天然蛋白L(Protein L)是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來的能和免疫球蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì),分子量為36 KD。本產(chǎn)品使用的是基因改造后的蛋白L ,既保留了與抗體k鏈結(jié)合的特性,同時也不會影響抗體的抗原結(jié)合位點。與 protein A 和 Protein G 相比,Protein L 更能廣泛地結(jié)合各種來源及亞類的抗體,包括人、小鼠、大鼠、兔和雞,但不結(jié)合牛、山羊或綿羊來源的免疫球蛋白。

rProtein L Agarose Resin 4FF是用于分離和純化單克隆抗體的通用性親和層析介質(zhì),產(chǎn)品以高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠為基質(zhì),重組Protein L為配基,具有很高的物理化學(xué)穩(wěn)定性,可以在相對較高的流速下進(jìn)行抗體的純化,適用于工業(yè)客戶。利用本產(chǎn)品經(jīng)過一步親和層析,可從腹水、血清和培養(yǎng)液等樣品中得到高純度的抗體,使用方便,應(yīng)用廣泛。

本品rProtein L 4FF Chromatography Column,5 mL是一種裝填了rProtein L Agarose Resin 4FF的中壓預(yù)裝柱,規(guī)格5 mL,預(yù)裝柱具有標(biāo)準(zhǔn)接口,可以適配商品化的各類中壓色譜系統(tǒng),如?KTA 等,方便客戶操作。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號

36416ES08 / 36416ES25

規(guī)格

mL /mL

 

產(chǎn)品性質(zhì)

 

基質(zhì)(Matrix)

高度交聯(lián)的4%瓊脂糖微球

配體(Ligand)

重組蛋白L

孔徑(Bead size)

45-165 µm

最大流速(Flowmax)

0.3 MPa, 3 bar

儲存緩沖液(Buffer)

20%乙醇的1×PBS

載量(Capacity)

15 mg Mouse IgG/mL基質(zhì)

pH范圍(pH range)

3-10

 

儲存條件

 

2~8℃保存,有效期2年。

 

需準(zhǔn)備試劑

 

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾除菌。

平衡/洗雜緩沖液:0.15 M NaCl,20 mM Na2HPO4pH 7.0

洗脫緩沖液:0.1 M甘氨,pH 3.0

中和液:1 M Tris-HCl,pH 8.5

 

使用說明

 

注】上柱之前要確保樣品溶液有合適的離子強(qiáng)度和pH值,可以用平衡/洗緩沖液對血清樣品、腹水或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋,或者樣品用平衡/洗緩沖液透析。樣品在上樣前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾,減少雜質(zhì)以防阻塞柱子。

  1. 樣品純化(以Akta為例)

1)準(zhǔn)備:將泵管道中注滿去離子水。去掉上塞子,將層析柱連接至色譜系統(tǒng)中。再折斷下口,將預(yù)裝柱下端口接到色譜系統(tǒng)中,并旋緊。

2)清洗:3-5倍柱體積去離子水沖洗層析柱中儲存液。

3)平衡:5倍柱體積的平衡Buffer平衡層析柱,使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,起到保護(hù)蛋白的作用。

4)上樣將樣品加到平衡好的層析柱中,推薦流速1-5 mL/min,保證目的蛋白與樹脂充分接觸,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待檢測。

【注】樣品的粘度增加使得即使上樣體積很少,也會導(dǎo)致層析柱很大的反壓。上樣量不要超過柱子的結(jié)合能力。大量的樣品體積也可能造成很大的反壓,使得進(jìn)樣器更難使用。

5)洗雜10-15倍柱體積的洗雜Buffer進(jìn)行清洗,直到紫外吸收達(dá)到一個穩(wěn)定的基線,去除非特異性吸附的雜蛋白,收集洗雜液,待檢測。

6)洗脫用洗脫Buffer 采用一步法或線性梯度洗脫。一步洗脫中,通常5倍柱體積洗脫液足夠?qū)⒛康牡鞍紫疵撓聛?。也可以用一個小的梯度,例如20倍柱體積或更多,來分離不同結(jié)合強(qiáng)度的蛋白質(zhì)。

7)清洗及保存依次使用3倍柱體積的平衡Buffer5倍柱體積的去離子水平衡填料,最后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡,然后保存在等體積的20%的乙醇中,置于4℃保存,防止填料被細(xì)菌污染。

2. SDS-PAGE檢測

將純化過程中得到的樣品(包括原始樣品、流出組分、洗雜及洗脫組分等)利用SDS-PAGE進(jìn)行檢測,判定其純化效果。

3. 填料清洗

rProtein L 4FF Chromatography Column可以重復(fù)使用而無需再生,隨著一些變性物質(zhì)的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和結(jié)合載量下降,影響柱子的性能,這時需對柱子進(jìn)行清洗:

1)去除沉淀或變性物質(zhì)

2倍柱體積的6 M 鹽酸胍溶液進(jìn)行清洗然后立即5倍柱體積的PBS,pH 7.4 清洗。

2)去除由于疏水性吸附造成的非特異吸附物質(zhì)

3-4倍柱體積的70%乙醇或2倍柱體積的1% Triton™ X-100清洗,然后立即5倍柱體積的PBS,pH 7.4 清洗。

 

注意事項

 

1. 請勿冷凍保存本產(chǎn)品。

2. 所有操作過程中,樣本需要在4℃或冰上操作。

3. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。




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