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參考價 | ¥1188 |
- 20567ES 型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質
- 上海市 所在地
500 µl | 1188元 | 99 件 可售 |
訪問次數(shù):230更新時間:2023-11-22 13:37:28
- 聯(lián)系人:
- 曹女士
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- 地址:
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
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產(chǎn)品描述
Anti-Myc免疫磁珠(Anti-Myc MagBeads)是一種聚合物磁性微球,由高質量的鼠源 IgG1 單克隆抗體與carboxyl magnetic beads通過供價偶聯(lián)制備,本產(chǎn)品具有快速的磁響應性,超順磁性、良好的分散性、粒徑均一、極低的非特異結合和豐富的結合位點等特點,可用于帶有Myc標簽的蛋白免疫沉淀(IP)。
產(chǎn)品性質
配體 | Anti-Myc Antibody(10D11) |
粒徑 | 200 nm |
結合能力 | >0.6 mg蛋白/mL 磁珠 |
磁珠體積 | 10 mg/mL |
儲存緩沖液 | 10 mM sodium phosphate, 150 mM sodium chloride, pH7.4, containing 0.02% (v/v) ProClin 30 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。2-8℃儲存。避免凍存!有效期1年。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
以免疫沉淀(IP)為例,步驟如下:
1樣品準備
樣品可以是細菌發(fā)酵液或者細胞裂解液, 樣品中不能含有顆粒不溶物,可以用0.22 μm濾膜過濾或10,000×g離心15 min。
2 磁珠預處理
2.1 用移液器輕柔吹打Anti-Myc免疫磁珠,使其充分混懸,取 25~50 µL 磁珠懸液置于1.5 mL離心管中。
2.2 加入500 µL IP Lysis/Wash Buffer并輕輕移液器混合,用移液器輕柔吹打重懸Anti-Myc免疫磁珠,接著在磁力架上靜置1 min后,吸棄上清。
2.3 重復步驟 2.2 兩次。
3樣品的結合
3.1 在預處理后的磁珠中加入蛋白樣品,置于翻轉混合儀上孵育(常溫2 h,4 ℃過夜);
3.2 將上述混合液置于磁力架上靜置1 min,然后把上清液轉移到新的離心管中備用(上清液可用于檢測Myc標簽蛋白是否存在殘留),原離心管中剩余的即為 蛋白-磁珠復合物;
注意:結合過程中,磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀,屬于正?,F(xiàn)象,不會影響實驗結果。
4洗滌
4.1 向步驟3.2所得的蛋白-磁珠復合物中加入 500 µL IP Lysis/Wash Buffer ,用移液器輕柔吹打重懸,接著在磁力架上靜置 1 min 后, 吸棄上清;
4.2 重復步驟4.1兩次,直至洗滌后的上清液OD280小于0.05為止;
注意:如上清液的OD280仍大于0.05,則適當增加洗滌次數(shù)。
5蛋白洗脫
根據(jù)下游用途選擇洗脫方法。
5.1 Myc融合蛋白洗脫
1) 配制Myc多肽洗脫液:TBS中溶解Myc多肽,終濃度為0.2-1 mg/mL。
2) 分別加入100 μL Myc多肽洗脫液,4 ℃孵育2 h-6 h(慢慢搖晃)
3) 分離磁珠上的磁珠并保存含有目標抗原的上清液。
4) 重復洗脫步驟一次以獲得更高的回收率
5.2 酸性洗脫(0.1 M Gly-HCl,pH 3.0)
1)加入100 μL 0.1 M Gly-HCl,pH 3.0,室溫孵育5-10 min(慢慢搖晃)。
2)分離磁珠上的磁珠并保存含有目標抗原的上清液。
3)中和低pH,每100 μL洗脫液加入20 μL中和緩沖液(1M Tris pH8.5)。最后的溶液可以用作樣品用于變性 SDS-PAGE。
5.3 用SDS-PAGE上樣緩沖液洗脫
如需直接檢測目的蛋白,則在上述洗滌過的蛋白-磁珠復合物中加入100 μL 1×SDS-PAGE上樣緩沖液,煮沸 5 min,冷卻至室溫并在磁力架上靜置 1 min 后,取上清進行 SDS-PAGE 檢測。