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內(nèi)毒素由革蘭氏陰性細(xì)菌在裂解過程中釋放，普遍存在于環(huán)境中。如果內(nèi)毒素進(jìn)入血液，可能會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的健康后果，包括發(fā)燒、敗血癥和敗血性休克。因此，針對注射用藥品和醫(yī)療器械規(guī)定了內(nèi)毒素檢測方法，以防止其內(nèi)毒素污染。

其中，使用鱟試劑檢測內(nèi)毒素是被廣泛接受的內(nèi)毒素檢測金標(biāo)準(zhǔn)方法¹，具有高可靠性和準(zhǔn)確性的特點(diǎn)。然而，檢測可能會(huì)出現(xiàn)干擾，并且可能是由多種不同因素引起的，包括待測樣品中的成分。其他可能導(dǎo)致樣品干擾的物質(zhì)也包括某些化學(xué)抑制劑、變性劑等物質(zhì)¹。另外pH 值、內(nèi)毒素掩蔽和內(nèi)毒素吸附也可能干擾檢測結(jié)果。

其中，(1,3)-?-D-葡聚糖與鱟試劑發(fā)生的級聯(lián)反應(yīng)可能是導(dǎo)致假陽性結(jié)果的主要因素^2,3。 (1,3)-?-D-葡聚糖會(huì)激活與內(nèi)毒素不同的通路（G因子通路），導(dǎo)致凝膠形成并出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因 (1,3)-β-D-葡聚糖存在于細(xì)胞壁中（如真菌的細(xì)胞壁），樣品或試劑的 (1,3)-β-D-葡聚糖污染可能源自真菌或含纖維素的材料。

針對(1,3)-?-D-葡聚糖造成的假陽性現(xiàn)象，FUJIFILM Wako開發(fā)了內(nèi)毒素特異性緩沖液ES-Buffer，可防止由(1,3)-β-D-葡聚糖激活G因子引起的級聯(lián)反應(yīng)。因此，ES-Buffer增強(qiáng)了內(nèi)毒素檢測的特異性，降低甚至消除了內(nèi)毒素檢測中出現(xiàn)假陽性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)。

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值得一提，FUJIFILM Wako的所有鱟試劑均添加了ES Buffer成分，具有內(nèi)毒素特異性。 ES-Buffer的加入使得FUJIFILM Wako的鱟試劑不會(huì)與 (1,3)-β-D-葡聚糖發(fā)生反應(yīng)，從而降低了假陽性結(jié)果的可能性。因此，F(xiàn)UJIFILM Wako的鱟試劑無需再添加ES-Buffer，使用更方便、簡單。

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此外，在鱟試劑中添加ES-Buffer可降低內(nèi)毒素檢測中出現(xiàn)假陰性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)。由于ES Buffer含有的緩沖成分，可中和酸堿，有助于將待測樣品的 pH 值維持在6-8 范圍內(nèi)，從而促進(jìn)內(nèi)毒素反應(yīng)并降低出現(xiàn)假陰性結(jié)果的可能性。

FUJIFILM Wako的內(nèi)毒素特異性緩沖液ES-Buffer可增強(qiáng)內(nèi)毒素檢測的特異性和可靠性，降低出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]Wheeler, A. Comparing endotoxin detection methods. Pharmaceutical Technology 2017;41:58–62.

[2]Dawson ME. Interference with the LAL test and how to address it. LAL Update 2005; 22(3): 1–5.

[3]Interfering factors in the LAL test. Fujifilm.

https://www.wakopyrostar。。ｃｏｍ/blog/kit-lal/post/interfering-factors-in-the-lal-test/

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