LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒

　　近年來研究人員多通過使用與人具有同樣的自身免疫性疾病的實驗動物自然發(fā)病和人為使實驗動物發(fā)癥的方式來研究自身免疫性疾病的機制闡明和新型藥物開發(fā)。自然發(fā)病系統(tǒng)代表的MRL/lpr小鼠被應用到很多實驗。MRL/lpr小鼠在淋巴結腫瘤發(fā)病同時伴隨著腎炎、血管炎、關節(jié)炎的高機率發(fā)病，對包含慢性風濕性關節(jié)炎（RA）模型的自身免疫性疾病發(fā)病機制的闡明，可作為有效的模型進行研究。MRL/lpr小鼠血清中被檢測出自身抗體有IgG型類風濕因子（RF）、IgM型類風濕因子（RF）、抗ssDNA 抗體、抗dsDNA 抗體、抗Sm 抗體。

　　通過使用該疾病動物血清中自身抗體含量做標準曲線，通過單位轉換，可進行測量之間數(shù)值的比較。

　　LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒采用了測定小鼠抗dsDNA 抗體濃度的夾心酶聯(lián)免疫測定法。

　　此試劑盒僅限研究使用。

◆特點

●全反應時間是4小時20分鐘。

●測定小鼠血清或者血漿（肝素血漿除外）中的抗dsDNA 抗體濃度。

●可測定微量樣本（標準操作法是5 μL）。

●1個試劑盒可做96孔。

●標準品是小鼠源。

●全部試劑均為液體。

試劑盒的保存和使用期限

　　試劑盒在2-8℃保存。此保存條件下，有效期（記載在外箱標簽）內試劑盒是穩(wěn)定的。開封的試劑對應保存狀態(tài)可能會受到影響，請盡早使用。

◆測定原理

　　本試劑盒是標準品、稀釋樣本在抗原包被的微孔板中進行孵育處理。孵育2小時后清洗，加入過氧化物酶結合抗小鼠IgG抗體，與捕捉的抗體孵育2小時。清洗后，顯色劑（TMB）與孔中殘留的過氧化物酶反應。添加酸性溶液可終止反應。反應生成的黃色產物在450 nm處（副波長620 nm）測定。吸光度與抗小鼠dsDNA 抗體濃度成正比。標準品濃度對應吸光度可制作成標準曲線。通過標準曲線獲得未知樣本濃度。

◆試劑盒組成

※根據(jù)批次不同，數(shù)值有差異。

◆所需必要設備

●蒸餾水。

●標準溶液稀釋用試管。

●清洗液（稀釋用溶液）用玻璃器具。（量筒·瓶）

●槍頭交換式移液器。（一次性槍頭5 μL正規(guī)的移液槍，以及50-450 μL正規(guī)的移液槍）

●連續(xù)分裝移液槍。（例：Eppendorf 的multipette plus、可進行100 μL連續(xù)分裝的儀器。）

●紙巾等吸水性物品。（清洗后去除板上殘留液體）

●攪拌器。（Vortex類型）

●96孔板用振蕩器。（約800 rpm）

●96孔板用清洗機（若有更好）或者注射瓶。

●96孔板酶標儀。（450 ±10 nm 、620 nm：600～650 nm）

●數(shù)據(jù)分析用軟件。（若有是更好）

◆試劑盒性能

●測定范圍

●小鼠抗dsDNA 抗體檢測范圍在15.6-1000 mU/mL內。

●特異性

●本ELISA系統(tǒng)使用的標識抗體對抗小鼠IgG抗體具有特異性。

●與小鼠IgM的反應交差性在檢測靈敏度以下。

●精密度實驗

●①批次變動（N=30）平均C.V.值是4.2%

●②日差可重復性實驗（N=30、3天）平均C.V.值是4.7%

LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒