詳細(xì)介紹
Phos-tag™ 黃色熒光染料
Phos-tag™凝膠熒光染料,是一種可在生理pH范圍內(nèi),對(duì)凝膠中的磷酸化蛋白進(jìn)行染色的熒光染料。進(jìn)行了SDS-PAGE,用本產(chǎn)品處理聚丙烯酰胺凝膠,可以對(duì)磷酸化蛋白進(jìn)行特異性染色。
本系列有波長(zhǎng)不同的黃、品紅、藍(lán)綠、淺綠四種顏色。每管規(guī)格為0.2毫克,可對(duì)約20個(gè)迷你凝膠進(jìn)行染色。
購(gòu)買前請(qǐng)注意:
使用Phos-tag™凝膠熒光染料,需要用到Phos-tagTM 5×染色通用混合溶液(產(chǎn)品編號(hào):383-15231)。請(qǐng)一同購(gòu)買。
◆特點(diǎn)
● 高靈敏度
● 在生理pH下即可染色
● 選擇性與pSer、 pTyr、 pHis以及pAsp殘基結(jié)合
● 無需放射性物質(zhì)、化學(xué)物質(zhì)標(biāo)簽、抗體
● 2小時(shí)內(nèi)完成染色
◆產(chǎn)品對(duì)比
其他公司產(chǎn)品A ● 凝膠pH:2~4 ● 5個(gè)步驟(固定、清洗、染色、脫色、清洗) ● 所需時(shí)間:≧5小時(shí) ● 溶液更換次數(shù):11次 ● 卵清蛋白檢測(cè)上限:~5ng/lane | Phos-tag™品紅 ● 凝膠pH:7~8(不進(jìn)行脫磷酸化) ● 3個(gè)步驟(固定、染色、清洗) ● 所需時(shí)間:≦2小時(shí) ● 溶液更換次數(shù):4次 ● 卵清蛋白檢測(cè)上限:~1ng/lane |
◆應(yīng)用實(shí)例①
磷酸化蛋白與非磷酸化蛋白的染色Phos-tag™淺綠
Lane.No.()內(nèi)為磷酸基團(tuán)數(shù)目
1. Marker 2.α-酪蛋白(9P) 3.經(jīng)ALP處理的α-酪蛋白 4.β-酪蛋白(5P) 5.經(jīng)ALP處理的β-酪蛋白 6.卵清蛋白(2P) | 7.經(jīng)ALP處理的卵清蛋白 8.胃蛋白酶(1P) 9.經(jīng)ALP處理的胃蛋白酶 10.β-半乳糖苷酶 11.牛血清白蛋白 12.碳酸酐酶 |
Phos-tag™淺綠染料選擇性:用Phos-tag™淺綠對(duì)10%(w/v)的PAGE膠進(jìn)行染色,其中分別含有四組完整的以及經(jīng)ALP(堿性磷酸酶)處理的磷酸蛋白(α-酪蛋白,β-酪蛋白,卵清蛋白和胃蛋白酶各1微克)(左),然后使用考馬斯亮藍(lán)CBB G-250染色(右)。
成功特異性地檢測(cè)出SDS-PAGE后的磷酸化蛋白。
數(shù)據(jù)提供:廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)學(xué)系科學(xué)研究科 醫(yī)藥分子機(jī)能科學(xué)研究室 木下惠美子老師、木下英司老師、小池透老師
◆應(yīng)用實(shí)例②
使用Phos-tag™熒光凝膠染料的組氨酸、天門冬氨酸的磷酸化分析
細(xì)菌通過將信息從組氨酸激酶EnvZ傳遞到應(yīng)答調(diào)控子OmpR來調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。分別分析有自磷酸化能力的EnvZ激酶和被EnvZ催化的OmpR中組氨酸和天門冬氨酸的磷酸化。
可以確認(rèn)Phos-tag™品紅和Phos-tag™ SDS-PAGE這兩種試劑中的His和Asp的磷酸化隨激酶的處理時(shí)間經(jīng)過不斷增強(qiáng)。尤其是使用Phos-tag™品紅時(shí),可以僅檢測(cè)出His磷酸化或Asp磷酸化。
數(shù)據(jù)提供:廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)學(xué)系科學(xué)研究科 醫(yī)藥分子機(jī)能科學(xué)研究室 木下惠美子老師、木下英司老師、小池透老師
◆應(yīng)用實(shí)例③
用于篩選組氨酸激酶抑制劑(新型抗生素)
使用Phos-tag™熒光凝膠染料,篩選組氨酸激酶抑制劑。
證實(shí)磷酸化依賴組氨酸激酶抑制劑濃度被抑制。
數(shù)據(jù)提供:廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)學(xué)系科學(xué)研究科 醫(yī)藥分子機(jī)能科學(xué)研究室 木下惠美子老師、木下英司老師、小池透老師
◆使用方法
※調(diào)整平衡及清洗溶液以及染色溶液必須使用Phos-tagTM 5×染色通用混合溶液 (產(chǎn)品編號(hào):383-15231)。
◆激發(fā)波長(zhǎng)/熒光波長(zhǎng)
Phos-tag™黃 | Phos-tag™品紅 |
Ex/Em=505納米/514納米
| Ex/Em=547納米/561納米
|
Phos-tag™藍(lán)綠 | Phos-tag™淺綠 |
Ex/Em=643納米/661納米 | Ex/Em=551納米/564納米 |
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
380-15241 | Phos-tag™黃色熒光染料 | 0.2毫克 |
386-15221 | Phos-tag™品紅熒光染料 | 0.2毫克 |
382-15201 | Phos-tag™淺綠熒光染料 | 0.2毫克 |
389-15211 | Phos-tag™藍(lán)綠熒光染料 | 0.2毫克 |
383-15231 | Phos-tag™ 5×染色通用混合溶液 | 1 EA |
◆相關(guān)產(chǎn)品
Phos-tag™丙烯酰胺
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
304-93521 | Phos-tag™丙烯酰胺 | 10毫克 |
300-93523 | 2毫克 | |
304-93526 | Phos-tag™丙烯酰胺5mM水溶液 | 0.3毫升 |
Phos-tag™預(yù)制膠
用于Bio-Rad伯樂電泳儀
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 電泳儀 | 規(guī)格 |
198-17981 | Phos-tag™預(yù)制膠50微摩爾/升,7.5%,17孔,BioRad型 | Mini-PROTEAN® Tetra Cell (Bio-Rad Laboratories, Inc.) | 5 塊 |
195-17991 | Phos-tag™預(yù)制膠50微摩爾/升,12.5%,17孔,BioRad型 | 5 塊 |
用于Life Technologies伯樂電泳儀
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 電泳儀 | 規(guī)格 |
192-18001 | Phos-tag™預(yù)制膠50微摩爾/升,7.5%,17孔,Life Technologies型 | XCell SureLock® Mini-Cell (Life Technologies, Inc.)
| 5 塊 |
199-18011 | Phos-tag™預(yù)制膠50微摩爾/升,12.5%,17孔,Life Technologies型 | 5 塊 |
Phos-tag™生物素
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
301-93531 | Phos-tag™生物素 | 10毫克 |
308-97201 | Phos-tag™生物素1mM水溶液 | 0.1毫升 |
Phos-tag™瓊脂糖
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
302-93561 | Phos-tag™瓊脂糖 | 0.5毫升 |
308-93563 | 3毫升 |
Phos-tag™瓊脂糖槍頭
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
387-07321-8P | Phos-tag™瓊脂糖槍頭 | 8pcs |
387-07321 | 8pcs×10 |
Phos-tag™質(zhì)譜分析試劑盒
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
305-93551 | Phos-tag™質(zhì)譜分析試劑盒 | 1set |
Phos-tag™ 黃色熒光染料