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硅膠珠型microRNA分離試劑盒

富士膠片和光提供能使從Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)化的“microRNA純化試劑盒”系列。使用本系列試劑盒能簡(jiǎn)便地從人和小鼠的細(xì)胞或組織中提取Ago蛋白結(jié)合的microRNA以及靶mRNA，還能從培養(yǎng)上清、血清、血漿中提取游離Ago蛋白結(jié)合的microRNA。所提取到的RNA可以應(yīng)用于qPCR、微陣列檢測(cè)、NGS等下游實(shí)驗(yàn)。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA純化試劑盒，以及采用了硅膠珠法的microRNA純化試劑盒。

microRNA純化試劑盒抗Ago抗體固定珠子具有非特異吸附性低的特征，它采用二氧化硅基聚合物珠粒，以離心為基礎(chǔ)進(jìn)行免疫沉淀操作。在從免疫沉淀后的硅膠珠中提取RNA的步驟時(shí)，采用苯酚/CHCl3提取（P/C法）及乙醇沉淀來(lái)提取RNA。富士膠片和光推出含有固定了抗Ago1抗體（2A7）、抗人Ago2抗體（4G8）、抗小鼠Ago2抗體（2D4）、抗人Ago3抗體（1C12）的硅膠珠的4種試劑盒。

◆操作示意圖

◆試劑盒使用實(shí)例

用microRNA純化試劑盒，人Ago2通過(guò)Urea-PAGE分離從三種5×10⁶ cells的人培養(yǎng)細(xì)胞株（HeLa、HepG2、HEK293），和小鼠培養(yǎng)細(xì)胞株（P388D1）中提取的microRNA組分，再進(jìn)行銀染（311-03961、CLEAR STAINAg、20 tests）檢測(cè)。結(jié)果表明能從人培養(yǎng)細(xì)胞中特異性提取microRNA（圖1）。以同樣的銀染試劑，檢測(cè)用microRNA純化試劑盒，小鼠Ago2從5×10⁶ cells的人培養(yǎng)細(xì)胞（HeLa）和嚙齒動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞株（P388D1、CHO、PC-12）中提取的microRNA組分。結(jié)果表明，能從三種嚙齒動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞株中特異性提取microRNA而不能從人細(xì)胞株中提?。▓D2）。

圖1.通過(guò)用人Ago2提取的microRNA的進(jìn)行銀染檢測(cè)

圖2. 對(duì)小鼠Ago2提取的microRNA的進(jìn)行銀染檢測(cè)

◆產(chǎn)品列表

 硅膠珠型microRNA分離試劑盒