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β-Amyloid ELISA 試劑盒

——定量檢測 Aβ40/Aβ42

　　阿爾茨海默癥（Alzheimer's Disease, AD)，俗稱老年癡呆癥，其特征是在大腦神經(jīng)細胞中存在老年斑（Senile Plaques,SPs） 和神經(jīng)元纖維纏結(jié)（Neuro Fibrillary Tangles, NFT），老年斑的主要組成蛋白是 β- 淀粉樣多肽（Amyloid Peptide, Aβ）40 和 42(43)，Aβ42 比 Aβ40 更容易發(fā)生聚集。因此，蛋白樣多肽的聚集開始于 Aβ42 而不是 Aβ40。出現(xiàn)了 Aβ42 而沒有出現(xiàn) Aβ40 是阿 爾茨海默癥的早期特征；出現(xiàn)了 Aβ40，尤其是在成熟老年斑的中心部分出現(xiàn)則代表進入阿爾茨海默癥的晚期階段。

　　本產(chǎn)品可檢測與阿爾茨海默病相關(guān)的淀粉樣蛋白β蛋白質(zhì)（1-40）以及淀粉樣蛋白β蛋白質(zhì)（1-42）的高靈敏度ELISA試劑盒。與以往試劑盒相比較，檢測靈敏度提高約10倍，檢測范圍在0.1~20.0（pmol/L）。

　　另外，因為以往產(chǎn)品同樣標志抗體Fab’化，非特異性結(jié)合降低。由于運用的是武田藥品工業(yè)株式會社開發(fā)的特異性非常高的單克隆抗體，不僅是組織提取液、培養(yǎng)上清液、腦脊髓液，而且以前檢測較困難的血漿中Aβ40以及Aβ42亦可高靈敏度檢測。

◆優(yōu)點

●  可檢測多種樣品類型：腦組織樣品，培養(yǎng)基上清樣品，腦脊髓液樣品， 血漿樣品等

●  特異性*的抗體，避免非特異性結(jié)合

　BAN50：Aβ肽N末端1-16特異性

　BNT77：Aβ11-28特異性

 　BA27：Aβ40 C末端特異性

　BC05：Aβ45 C末端特異性

●  *的靈敏度，可檢測至 pmol 級含量

●  使用此產(chǎn)品的文章已在Science、Biochemistry、Neuron 等多家刊物發(fā)表

◆試劑盒構(gòu)成　　

抗體包被的微平板                          1 塊 標準溶液                                        2mL×2支   標準稀釋液                                     2 mL×2支 清洗液（20x）                               50 mL×1支 HRP標記抗體溶液                          12 mL×1支 TMB溶液                                        12 mL×1支 終止液                                            12 mL×1支 密封件                                            3支

① 加入100 μL 的標準品和樣品，在4 度冰箱中密封過夜。 

↓

② 加入HRP標記的抗體溶液，在4 度冰箱中孵育。

↓

③ 加入100 μL TMB 溶液室溫孵育30 分鐘，避光，密封蓋子，進行顯色反應(yīng)。

↓

④ 加入100 μL 終止液，測OD450 nm值。

◆案例

案例1.人、小鼠血漿的測定

　　使用EDTA2K真空采血管采血，置于5000 g、4℃、離心15分鐘，分離血漿，使用之前存放于-80℃。

　　用試劑盒附帶的標準稀釋液，4倍樣本稀釋后測定。

　?。?Aβ（1-40）以及Aβ（x-40）的測定使用人β淀粉樣蛋白（1-40）ELISA試劑盒WakoⅡ（產(chǎn)品編號：298-64601）以及人/大鼠β淀粉樣蛋白（40）ELISA試劑盒WakoⅡ（產(chǎn)品編號：294-64701）。

案例2.小鼠腦組織的測定

　　用2 mL的Tris鹽水提取12月齡APP轉(zhuǎn)基因小鼠（J20）的腦半球，使用之前置于-20℃保存。

　　用試劑盒附帶的標準稀釋液，2倍樣本稀釋后測定。

　　除了轉(zhuǎn)基因（tg）小鼠，也可測定野生型（wt）小鼠的微量Aβ。

（數(shù)據(jù)提供：東京大學(xué)大學(xué)院藥學(xué)研究科 臨床藥學(xué)教室 巖坪教授 橋本助手）

標準曲線

　　用試劑盒附帶的標準溶液制作標準曲線。結(jié)果顯示，在0.1~20.0（pmol/L）范圍內(nèi)，接近于直線。

添加回收實驗

　　向血漿中分別加入5、10、20（pmol/L），4倍稀釋后記錄測定時的回收率（%）（測定值/理論值）?；撅@示較高的回收率。

稀釋實驗

　　將A、C、E的正常人血漿稀釋2~16倍后求稀釋曲線。結(jié)果顯示，特別是人/大鼠系列獲得了良好的稀釋曲線。

◆產(chǎn)品列表