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詳細(xì)介紹
重組羧肽酶B（RCPB）
◆概述
羧肽酶B（E.C 3.4.17.2）屬金屬羧肽酶A和羧肽酶B（CPA/CPB）家族，可選擇性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪類氨基酸殘基的羧肽酶A，羧肽酶B優(yōu)先切割堿性氨基酸※，同時(shí)也能切割一些非堿性氨基酸。重組CPB的活性受到典型的金屬螯合劑如EDTA，及Cu2+，Hg2+抑制；而Zn2+，Mn2+等金屬離子則能夠不同程度提高酶活。CPB的適pH為8.0，偏酸或偏堿均會(huì)造成活性下降，pH接近5.0時(shí)活性接近零，pH>12.0時(shí)活性*喪失。CPB在一定溫度內(nèi)（<60 ℃）活性隨溫度升高而上升。
※堿性氨基酸：水解生成的氫氧根負(fù)離子多于氫正離子的氨基酸，其特點(diǎn)是側(cè)鏈常含有可質(zhì)子化的堿性化學(xué)基團(tuán)。包括以下三種：
中文名 | 英文名 | 縮寫 | 符號(hào) | 等電點(diǎn) |
精氨酸 | Arginine | Arg | R | 10.76 |
賴氨酸 | Lysine | Lys | K | 9.74 |
組氨酸 | Histidine | His | H | 7.59 |
◆優(yōu)勢
● 單批次產(chǎn)量大，批間差小
● 高純度，高比活性
● 無外源性病毒污染，無動(dòng)物源生產(chǎn)原料
◆應(yīng)用范圍
生產(chǎn)工藝：重組胰島素及其類似物的生產(chǎn)制備工藝，重組多肽類藥物的生產(chǎn)制備工藝等。
質(zhì)控與科研：單克隆抗體的質(zhì)量檢測，蛋白質(zhì)C-末端氨基酸測定等。
◆純度
SDS-PAGE顯示純度＞90%。
◆使用方法
保存：25 mmol/L Tris-HCl， pH 7.6或無菌水；溶解后分裝-15 ℃以下保存。
酶切體系：pH 7.5~9.0；
推薦使用量：蛋白酶：融合蛋白質(zhì)量比1：50~1：1000
◆保存條件
儲(chǔ)存穩(wěn)定性：凍干粉存于-15 ℃以下，24個(gè)月穩(wěn)定；25 mmol/L Tris-HCl，pH 7.6溶解后分裝儲(chǔ)存于-15 ℃以下，
儲(chǔ)存穩(wěn)定性：反復(fù)凍融5次，活性無損失；溶解后2~8 ℃保存建議不超過3 d。
運(yùn)輸穩(wěn)定性：冰袋保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定。
◆應(yīng)用實(shí)例
RCPB特異性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理論酶切位點(diǎn)酶切產(chǎn)物YGKRLW及K，蛋白酶：合成多肽質(zhì)量比1：5000，37 ℃酶切反應(yīng)10 min，LC-MS驗(yàn)證酶切反應(yīng)特異性。
Peak# | R.T. | M.W. | Sequence |
Peak 1 | 7.06 min | 950.15 | YGKRLWK |
Peak 2 | 8.27 min | 821.98 | YGKRLW |
◆產(chǎn)品信息
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 比活 |
RCPB0302 | RCPB | 10 mg | 150 U/mg |
RCPB0304 | RCPB | 10 μg | 150 U/mg |
◆相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 | 其他信息 |
MDRK0301 | 重組羧肽酶B檢測試劑盒 | 96 孔 | 2～8 ℃ | 檢測范圍： |