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詳細(xì)介紹
組織分散酶 DISPASE® I、DISPASE® II
DISPASE® 是切斷肽鏈的中性、非極性氨基酸N 末端的金屬蛋白酶，能夠把上皮細(xì)胞從組織上剝離成片狀。以前技術(shù)人員一直把它用于原代培養(yǎng)的細(xì)胞分離以及分散。近年，在再生醫(yī)學(xué)和組織工程的領(lǐng)域上也有廣泛應(yīng)用，可以和膠原酶配合使用。此酶分離細(xì)胞迅速有效又溫和，細(xì)胞能保持完整，不會給細(xì)胞膜帶來傷害，無動物源原料，不含支原體或動物病毒污染，對于血清成分、酶濃度、處理事件、溫度、pH非常穩(wěn)定。
DISPASE®Ⅰ | DISPASE® Ⅱ | |
特性 | 結(jié)晶酶，無菌產(chǎn)品 | 粉末酶，非無菌產(chǎn)品 |
包裝 | 6小瓶 | 1 g |
酶活性 | 10,000-13,000 PU/小瓶 | 300,000-360,000 PU/g |
添加劑等 | 含有醋酸鈣 | 含有糊精和醋酸鈣 |
儲存·有效期 | 生產(chǎn)后在2～10℃下可儲存2年（未開封）； 開封溶解后請凍存在-20℃以下，并在6個月內(nèi)使用。 | |
◆優(yōu)點(diǎn)、特色
● DISPASE® 是來源于Paenibacillus sp. （舊名：Bacillus polymyxa ）的中性金屬蛋白酶?；钚灾行?/span>
● 有Zn2+，比Ca2+ 穩(wěn)定。
● 酶活性幾乎不受血清成分影響，因此不論是否有血清，都可以使用本產(chǎn)品。同時可簡單地通過添加EDTA
● 或者稀釋反應(yīng)液來停止酶反應(yīng)。
● 可以很好地分解構(gòu)成基底膜的Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白，讓上皮細(xì)胞從組織上剝離成片狀。
● 與胰蛋白酶、膠原酶等蛋白酶的作用不同，造成的細(xì)胞損傷更少，可溫和地分散細(xì)胞。
● 由于作用條件的范圍廣泛，可以在不同的酶濃度、處理時間、溫度以及pH 條件下，使酶發(fā)生作用。
● 細(xì)胞培養(yǎng)溫度一般在37℃，酶在此溫度下非常穩(wěn)定。根據(jù)細(xì)胞種類的不同，可以往培養(yǎng)基里添加本產(chǎn)品，
● 進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。
● 本產(chǎn)品不含支原體。
● 本產(chǎn)品沒有使用動物源原料。
◆案例、應(yīng)用
酶濃度 | 100 ～ 2,000 PU/mL |
溶解液 | 含有Ca2+ 的緩沖液或者培養(yǎng)基（可含有血清） |
反應(yīng)時間 | 30 分鐘～幾天 |
反應(yīng)溫度 | 室溫～ 37℃ |
反應(yīng)pH | 6.5 ～ 9.0 |
抑制因子 | EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+ |
※ 1PU 的定義是使用酪蛋白分解法1 分鐘內(nèi)分離1 微克酪氨酸的酶活性。
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| 386-02271 | DISPASE®Ⅰ 分散酶® | 1 g |
| 383-02281 | DISPASE® Ⅱ 分散酶®Ⅱ | 1 g |