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上海嘉鵬

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凝膠成像系統(tǒng)應(yīng)用分析詳細(xì)介紹

2016-3-24　閱讀(3008)

    凝膠成像系統(tǒng)即對(duì)DNA/RNA/蛋白質(zhì)等凝膠電泳不同染色（如eb、考馬氏亮藍(lán)、銀染、sybr green）及微孔板、平皿等非化學(xué)發(fā)光成像檢測(cè)分析。凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算，密度掃描，密度定量， PCR定量等生物工程常規(guī)研究。
    凝膠成像系統(tǒng)應(yīng)用范圍
    總體上來說凝膠成像系統(tǒng)可以用于：蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。
    （1）分子量定量
    對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對(duì)膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。
    （2）密度定量
    一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據(jù)與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PA GE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。
    （3）密度掃描
    在分子生物學(xué)和生物工程研究中,zui常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項(xiàng)工作。
    （4）PCR定量
    PCR定量主要是指，如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來的條帶不是一條，那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言，與密度掃描類似，但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。


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