產品簡介
詳細介紹
哈希分光光度計采用基座和比色皿上樣雙檢測模式,是一款高再現性的全波長分光光度計。適用于更寬濃度范圍的樣品檢測,操作簡便,不僅可用于測量DNA,RNA純度、濃度,測量蛋白質濃度,也可用于一般物質分析中的吸光度檢測。它可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光,物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。
哈希分光光度計常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的更高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數。如:1OD的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經過上述系數的換算,從而得出相應的樣品濃度。
影響哈希分光光度計讀數不穩(wěn)定的根本原因應該有兩類:一類是能量降低,信噪比下降,這個可能性比較大;另一類是信號接收和處理故障。
1、能量降低
(1)比色皿
如果是在400nm以下波長測量,需使用石英比色皿,假如使用普通玻璃比色皿會吸收大部分的紫外能量。還有比色皿一般有光面和毛面之分,毛面是手捏的,光面是對正光路的。
?。?)樣品架
檢查樣品架是否在正確的槽位上,光是否全部照在比色皿上。方法是把波長設定到550nm左右,這時是比較明亮的黃綠色光,在樣品室內用個小紙片擋下就能看到光斑。這個方法也能檢測可見區(qū)的光源是否正常,濾光盤及波長驅動是否正常。
(3)空白樣品
樣品室不放任何東西對空氣調零,看是否穩(wěn)定。如果穩(wěn)定的話,應該是空白樣品本身吸光度太高了。方法是先對空氣調零,然后把空白樣品放入光路中看讀數。如果讀數很大,例如接近3A,則不可用。
?。?)光源
先確認分析波長值,一般紫外可見有2個光源,紫外區(qū)用氘燈,可見區(qū)用鎢燈,切換點一般在340nm。鎢燈光較為明亮刺眼,氘燈光偏青紫色。如果儀器后面有透光窗口可以直接看,如果沒有的話,需要打開外殼,打開燈室罩。光源都是用壽命的,能量變弱或干脆不亮了,要換燈。也有比較小的可能是光源供電電路故障,例如電源老化后可能導致無法正常點亮氘燈。
?。?)光路
看光路是否偏了,可以把波長設定到550nm左右,觀察樣品室內有無黃綠色光線,光斑能否正確照在接收器窗口上。確認燈室內光源光斑是否正確照在單色器入狹縫上,確認光路中有無雜物擋住。確認單色器內反射鏡、透鏡、光柵、濾光片等是否發(fā)霉或積滿灰塵,這個需要廠家才能處理。
?。?)驅動電路故障
例如濾光盤驅動異常,導致濾光片用錯或者干脆光路被遮擋。一般廠家或專業(yè)人員處理。
2、信號接收和處理故障
接收器(例如光電池或者光電倍增管)、放大電路、AD轉換電路等都有可能。這類問題一般由廠家或專業(yè)人員處理,這里不詳細說明了。