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美德聲【萬事泰】 ISOPLEX® CRE-ART 是一種用于專業(yè)用途的體外診斷試劑盒，基于環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）技術(shù)，用于定性和區(qū)分從臨床樣本中分離出的碳青霉烯類耐藥腸桿菌目（CRE）和其他碳青霉烯類耐藥細(xì)菌。

該試劑盒通過LAMP技術(shù)，在恒溫（63°C）下對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，能夠在30分鐘內(nèi)檢測(cè)出OXA-48、OXA-23、OXA-24/OXA-40、KPC、VIM、NDM和IMP等基因的存在。試劑盒包含8管條帶，每管針對(duì)一個(gè)特定的DNA目標(biāo)（7管用于檢測(cè)目標(biāo)基因，1管用于抑制對(duì)照）。

主要組件：

- IC DNA：抑制對(duì)照DNA

- RB3：重構(gòu)緩沖液

- WTR：分子級(jí)水

- CRE STRIP：特定目標(biāo)LAMP檢測(cè)試劑條帶（10條，每條8管）

所需設(shè)備：

1. 實(shí)時(shí)PCR儀器或能夠進(jìn)行等溫DNA擴(kuò)增和熒光檢測(cè)的設(shè)備。

2. 微生物培養(yǎng)基，用于從患者樣本中分離單菌落。

3. 無核酸酶的1.5 mL反應(yīng)管。

4. 臺(tái)式離心機(jī)、板式離心機(jī)或微量離心機(jī)。

5. 無核酸酶的實(shí)驗(yàn)耗材（如移液器、移液器吸頭等）。

6. 加熱設(shè)備（95°C加熱塊）。

7. 個(gè)人防護(hù)裝備（實(shí)驗(yàn)服、手套、護(hù)目鏡）。

試劑準(zhǔn)備：

1. 準(zhǔn)備抑制對(duì)照DNA（ICDNA）：將分子級(jí)水加入ICDNA管中，溶解后混勻。

2. 從臨床樣本中分離細(xì)菌菌落，遵循標(biāo)準(zhǔn)微生物操作規(guī)范。

存儲(chǔ)和保質(zhì)期：

- 未開封的試劑盒可在2°C至30°C下儲(chǔ)存，避免陽光直射。

- 重構(gòu)后的ICDNA可在2°C至8°C下短期保存，長(zhǎng)期保存需分裝后冷凍（-20°C）。

警告和注意事項(xiàng)：

1. 該試劑盒僅限專業(yè)人員使用，操作人員需經(jīng)過相關(guān)培訓(xùn)。

2. 樣本處理需遵循生物安全規(guī)范，防止污染。

3. 使用無核酸酶的實(shí)驗(yàn)耗材，避免DNA降解。

4. 反應(yīng)管在加熱后需立即冷卻，防止試劑失活。

樣本處理：

- 從臨床樣本中分離的細(xì)菌菌落需經(jīng)過過夜培養(yǎng)，獲得單菌落后進(jìn)行檢測(cè)。

檢測(cè)步驟：

1. 將90 µL RB3緩沖液加入1.5 mL反應(yīng)管中。

2. 用無菌牙簽或移液器吸頭挑取單菌落，混入反應(yīng)管中。

3. 加入10 µL重構(gòu)的ICDNA，混勻。

4. 將反應(yīng)管在95°C加熱5分鐘，隨后立即冷卻。

5. 將反應(yīng)混合物加入CRE STRIP的每個(gè)管中，離心后放入等溫?cái)U(kuò)增儀器中進(jìn)行檢測(cè)。

結(jié)果解釋：

- 檢測(cè)結(jié)果由儀器軟件分析，陽性結(jié)果表現(xiàn)為熒光強(qiáng)度的顯著增加。

- 管8（ICDNA）必須為陽性結(jié)果，否則檢測(cè)無效。

性能特點(diǎn)：

- 靈敏度：能夠檢測(cè)到極低濃度的目標(biāo)DNA（如OXA-48的檢測(cè)限為0.13 fg/µL）。

- 特異性：100%特異性，不與已知的β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

- 診斷性能：在248個(gè)臨床分離株中，檢測(cè)靈敏度為100%，特異性為97%。

局限性：

1. 該試劑盒僅適用于從臨床樣本中分離的細(xì)菌菌落檢測(cè)。

2. 檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合其他臨床因素進(jìn)行綜合判斷。

3. 試劑盒未針對(duì)某些特定的β-內(nèi)酰胺酶（如OXA-535、VIM-7等）進(jìn)行檢測(cè)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

- 手動(dòng)作時(shí)間 15 分鐘，運(yùn)行時(shí)間 30 分鐘，快速出結(jié)果。

- 即用型，適用于包含所有引物和試劑的凍干沉淀。

- 高度敏感和特異性，讓您對(duì)結(jié)果充滿信心。

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