外泌體

外泌體是多泡體限制性膜與細胞質(zhì)膜融合而釋放的脂質(zhì)雙層膜囊泡，直徑約30～200 nm，電子顯微鏡下呈雙凹碟形或杯狀，外泌體能夠運載其內(nèi)源性的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸、miRNA等信息物質(zhì)參與細胞間通訊和機體的生理代謝過程，被認為是細胞間通訊、疾病診斷和預(yù)后循環(huán)生物標志物的重要載體，在臨床診斷和治療方面展現(xiàn)出了具景的研究價值。外泌體通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學活性，從而參與機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等生物學過程。

外泌體的負富集分離

外泌體在大小、來源和分子內(nèi)容物方面均存在高度異質(zhì)性，因此富集分離外泌體是開展其基礎(chǔ)研究和臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用的提。傳統(tǒng)經(jīng)典的富集分離外泌體的方法有：超速離心、密度梯度離心、試劑盒等技術(shù)手段。

外泌體鑒定

WB/ELISA檢測膜蛋白：CD9、CD63、CD81，Alix, TSG101等。

透射電鏡：形態(tài)學鑒定，雙層囊膜結(jié)構(gòu)是外泌體重要標志。

NTA納米顆粒跟蹤分析：外泌體特征粒徑大多數(shù)處于100nm左右。

NTA、電鏡和WB鑒定外泌體

需確認的信息

1. 樣本類型及種屬

2. 樣本數(shù)量

3. 需鑒定方式（WB、電鏡、NTA）