徠同生物 - 細胞周期－流式細胞增殖實驗（2025 年最新版）

技術(shù)原理

EdU（5-ethynyl-2' -deoxyuridine），中文全稱為 5 - 乙炔基 - 2' - 脫氧尿苷，是一種新型的胸苷（即胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine）類似物。在細胞進行 DNA 合成的過程中，EdU 能夠憑借其結(jié)構(gòu)特性，替代胸苷摻入到新合成的 DNA 鏈中。

從化學反應層面來看，EdU 分子上的乙炔基具有du特的化學活性，它能與經(jīng)過熒光標記的小分子疊氮化物探針（例如 Azide Alexa Fluor 488、Azide Alexa Fluor 555、Azide Alexa Fluor 594、Azide Alexa Fluor 647 等），在一價銅離子的催化作用下發(fā)生高效的共價反應，進而形成穩(wěn)定的三唑環(huán)結(jié)構(gòu)。這一極為迅速的反應，被科研領(lǐng)域稱作點擊反應（Click reaction）。

通過點擊反應，新合成的 DNA 會被相應的熒光探針特異性地標記上。如此一來，科研人員便可以借助合適的熒光檢測設(shè)備，精準地檢測到處于增殖狀態(tài)的細胞，從而為細胞周期和增殖相關(guān)的研究提供有力的技術(shù)支持。

實驗方法du

1. 細胞培養(yǎng)：精心挑選合適的細胞系，按照其特定的生長需求，在適宜的細胞培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，為后續(xù)實驗奠定良好的細胞基礎(chǔ)。

2. 轉(zhuǎn)染或藥物處理：根據(jù)實驗設(shè)計，對培養(yǎng)的細胞進行轉(zhuǎn)染操作，導入特定的基因片段；或者施加相應的藥物處理，以觀察細胞在不同條件下的反應。

3. 加      EDU 試劑：在細胞處于合適的生長階段時，向培養(yǎng)體系中加入適量的 EDU 試劑，使其能夠順利摻入到正在合成的 DNA 中。

4. 細胞收集：待 EDU 摻入達到預期時間后，采用合適的方法收集細胞，確保細胞的完整性和活性，為后續(xù)的檢測做準備。

5. 上機檢測：將收集到的細胞進行必要的處理后，置于流式細胞儀上進行檢測，通過分析熒光信號來獲取細胞增殖的相關(guān)數(shù)據(jù)。