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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>BCA法 & Bradford法:蛋白質(zhì)定量優(yōu)選方案
的蛋白質(zhì)定量是蛋白質(zhì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)所必需的,這些實(shí)驗(yàn)涉及分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué),生物化學(xué),發(fā)育生物學(xué)和神經(jīng)科學(xué)的研究課題。常用的蛋白質(zhì)定量分析方法主要是BCA法和Bradford法,這兩種方法各有所長,研究者需要根據(jù)裂解液的情況,進(jìn)行選擇。
關(guān)于實(shí)驗(yàn)的原理:
BCA法實(shí)驗(yàn)原理:堿性條件下,蛋白質(zhì)分子中的肽鍵結(jié)構(gòu)能與Cu2+結(jié)合生成紫色絡(luò)合物,同時(shí)將Cu2+還原為 Cu+。BCA試劑可靈敏特異的與Cu+結(jié)合,形成穩(wěn)定的有顏色的絡(luò)合物,562nm處有高的吸收值,可在 540-595nm測定其吸收值,顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比
Bradford法實(shí)驗(yàn)原理:考馬斯亮藍(lán)G250,在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)?青色,蛋白質(zhì)—色素結(jié)合物在595nm波長下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比。
好吧,我決定還是說人話,關(guān)于蛋白質(zhì)定量方法選擇之秘籍(BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒和Bradford蛋白質(zhì)定量試劑盒):
如果裂解液中含有較高濃度的如下組分 | 請選擇此方法 |
去污劑:SDS、Triton X-100,Tween 20等 | BCA-KTD3001 |
還原劑:DTT、TCEP 和 β-巰基乙醇等 | Bradford-KTD3002 |
為什么推薦Abbkine精心準(zhǔn)備的蛋白質(zhì)定量組合方案呢?
產(chǎn)品名稱 | 原理 | 貨號 |
Protein Quantification Kit (BCA Assay) | BCA | KTD3001 |
Protein Quantification Kit (Bradford Assay) | Bradford | KTD3002 |
BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒和Bradford蛋白質(zhì)定量試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):
" 節(jié)省時(shí)間 — 比傳統(tǒng)的Lowry方法更容易,速度快4倍。
" 靈敏高 — 檢測線低至25ug/ ml,低檢測蛋白量達(dá)到0.5ug。
" 線性 — 線性標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍:50 - 1000 ug/ml
" 良好的穩(wěn)定性 — 與染料結(jié)合的方法相比,蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間差異更小。
" 性價(jià)比高 — 良好的性價(jià)比,單次實(shí)驗(yàn),成本更低!
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