SiR-actin具有熒光性、細胞通透性和對F-actin的高度特異性。Sir-actin染色內源性的F-actin不需要基因操作或過表達。它在遠紅光中的發(fā)射最大限度地降低了光毒性和樣品的自身熒光。SiR-actin兼容GFP和/或m-cherry熒光蛋白質。它可以用標準的Cy5濾鏡進行成像。SiR-actin可用于活細胞和組織的寬視場、共聚焦、SIM或STED成像。探針數量允許50 - 200染色實驗。*(*基于以下條件:0.5 - 1ml染色液/ 0.5 - 1um探針濃度的染色實驗。染色實驗的數量可以通過減少體積或探針濃度來進一步增加)。
艾美捷 SiR-Actin試劑盒#CY-SC001物理特性:
abs 652 nm
Em 674 nm
ε652 nm 1.0·105 mol-1·cm-1
MW 1241.6 g/mol
MF C71H88N8O10Si
SiR-Actin細胞成像
SiR-actin的成像最好使用標準Cy5設置進行。標記后,活細胞可以無需洗滌步驟即可立即成像??蛇x地,一個簡單的洗滌步驟包括更換一次用不含探針的新鮮培養(yǎng)基標記溶液通常提高信噪比。如果時間流逝進行成像時,建議在整個實驗過程中保持探針濃度等于或低于100nM獲得恒定的信號,并避免探針干擾肌動蛋白動力學(減少細胞增殖)。如果清洗細胞
在成像之前,染色將持續(xù)幾個小時。
探針濃度(nM) 建議標記時間(h)*
> 1000 0.5 - 1
500 3 - 4
200 4 - 6
< 100 6 - 12
SiR-Actin試劑盒文獻參考:
1. Fluorogenic probes for live-cell imaging of the cytoskeleton, G. Lukinavi?ius et al., Nature Methods, 11, 731–733 (2014)
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