基于人類免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的慢病毒載體已成為一種有前景的載體用于基因轉移研究的載體。慢病毒載體的優(yōu)勢在于基因轉移和整合為分裂細胞和非分裂細胞。囊泡性假型包膜口腔炎病毒包膜G(VSV-G)蛋白拓寬了靶細胞的范圍。慢病毒載體已被證明可以將基因傳遞給神經元、淋巴細胞和巨噬細胞,這些細胞類型以前不能使用逆轉錄病毒載體。慢病毒載體也被證明在轉導在體內沒有毒性或免疫反應的腦、肝、肌肉和視網膜。最近,慢病毒該系統(tǒng)被廣泛用于在多種細胞系和原代細胞中有效整合siRNA在體外和體內。
慢病毒顆粒是由293T細胞通過瞬時轉染質粒產生的編碼病毒粒子的成分(圖1)。出于對傳染病的安全考慮HIV-1的性質,最近的慢病毒包裝系統(tǒng)已經將病毒成分分離成3或4種質粒。但是,這些系統(tǒng)生成復制能力的機會仍然很小重組后的慢病毒。此外,大多數(shù)商業(yè)慢病毒包裝系統(tǒng)提供在預混制劑中含有-病毒結構蛋白的質粒,使其幾乎不可能以優(yōu)化特定實驗和宿主細胞的各種質粒的比例。
艾美捷ViraSafe 慢病毒包裝質粒系統(tǒng)#VPK-206提供了一種更安全的包裝方法慢病毒,同時仍然提供高病毒滴度。此外,每個質粒是單獨提供的,而不是而不是在包裝混合物中。這使您能夠靈活地擴增單個質粒為你的實驗優(yōu)化質粒的比例。
ViraSafe 慢病毒包裝質粒系統(tǒng)主要功能:
1.包裝質粒:改進包裝質粒以提高性能并減少矢量分量之間重組的可能性。
a.盡量減少HIV序列——無輔助蛋白、Tat或Rev或LTR
b.通過密碼子擺動Gag序列防止與載體SM重疊
c.通過結合腺病毒VAI元件來提高顆粒的產生
2.靈活:包括包裝矢量在內的所有矢量都是單獨提供的,以允許最終用戶優(yōu)化載體比例以獲得最大慢病毒產量。
圖1:293T細胞中慢病毒的產生
ViraSafe 慢病毒包裝質粒系統(tǒng)相關研究:
1. LTV-100: 293LTV Cell Line
2. LTV-200: ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit
3. VPK-107: QuickTiter™ Lentivirus Titer Kit (Lentivirus-Associated HIV p24)
4. VPK-108-H: QuickTiter™ Lentivirus Quantitation Kit (HIV p24 ELISA)
5. VPK-205: ViraSafe™ Lentivirus Packaging System, Ecotropic
6. VPK-211: pSMPUW Universal Lentiviral Expression Vector (Promoterless)
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