您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>全能核酸酶(同 Benzonase)應(yīng)用程序說明
超級(jí)核酸酶是一種通過基因表達(dá)獲得的基因工程重組產(chǎn)物。與苯甲酸酶核酸酶相似,它是粘質(zhì)沙雷氏菌分泌的一種廣譜核酸酶,由兩個(gè)亞基組成,每個(gè)亞基大小為26kDa。它也被稱為非限制性核酸內(nèi)切酶,表現(xiàn)出比DNA酶I強(qiáng)34倍的活性。它可以有效地切割單鏈和雙鏈DNA和RNA,消化3-5個(gè)堿基長度的5’-單磷酸寡核苷酸(低于雜交極限)。其活性需要Mg2+離子,合適pH范圍為6至10,優(yōu)選反應(yīng)溫度為37°C。該產(chǎn)品以野生型苯甲酸酶為基礎(chǔ),經(jīng)過基因工程改良,在酵母中表達(dá)和純化。它具有去甲側(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素,并在各種條件下(6M尿素、0.1M鹽酸胍、0.4%Triton X100、0.1%SDS、1mM EDTA、1mM PMSF、0.4%脫氧膽酸鈉)保持高穩(wěn)定性和消化活性。它被廣泛用作各種科學(xué)研究領(lǐng)域以及疫苗、蛋白質(zhì)和多糖制藥行業(yè)的首-選酶制劑,用于去除樣品或產(chǎn)品中的核酸殘留物,提高樣品純度和產(chǎn)品生物效率。
艾美捷全能核酸酶(同 Benzonase):
Cat #: C-BSM2907
Size: 25 KU / 50 KU / 100 KU
Storage: -20°C
全能核酸酶(同 Benzonase)組分:
酶活性定義
一個(gè)單位(U)的活性被定義為在2.625ml反應(yīng)體系中,在37°C和pH 8.0的條件下,在30分鐘的反應(yīng)中引起A260吸收峰改變1.0所需的酶的量(相當(dāng)于將37μg鯡魚精子DNA完-全消化成寡核苷酸)。
全能核酸酶(同 Benzonase)應(yīng)用程序:
1.降解各種形式的DNA和RNA,使其成為在制備疫苗、抗體、細(xì)胞療法和其他生物產(chǎn)品時(shí)去除核酸(DNA和RNA)污染的最-佳工具,以滿足美國食品藥品監(jiān)督管理局的標(biāo)準(zhǔn),即用于治療的生物制藥中核酸殘留量不超過10 pg/劑。
2.通過降解核酸降低細(xì)胞裂解物的粘度,促進(jìn)溶液過濾/超濾過程,縮短處理時(shí)間,提高病毒、AAV載體和來源于細(xì)胞的包涵體純化過程中沉淀物和上清液的分離效率,提高色譜純化效率,zui終提高產(chǎn)量和產(chǎn)品純度。
3.在生物分析中的應(yīng)用:可用于制備ELISA樣品、色譜法、二維電泳(蛋白質(zhì)圖譜)和蛋白質(zhì)印跡分析,以提高分辨率和樣品回收率。
質(zhì)量控制
蛋白質(zhì)純度檢測:
產(chǎn)品經(jīng)SDS-PAGE檢測,純度≥95%。蛋白酶殘留檢測:
將產(chǎn)品與蛋白質(zhì)底物在37°C下孵育16小時(shí),并使用SDS-PAGE凝膠電泳檢測底物。蛋白質(zhì)底物應(yīng)該沒有顯著變化。
內(nèi)毒素殘留檢測:
內(nèi)毒素殘留量<10 EU/ml
備注:
1.在處理RNA樣品時(shí),將其加入不含RNase的試管中。
2.超級(jí)核酸酶的有效工作溫度范圍為0~42°C,最適工作溫度為37℃。酶活性在低溫下可能會(huì)降低,但這可以通過添加2至5倍量的苯甲酸酶核酸酶或延長消化時(shí)間(2至3小時(shí))來補(bǔ)償。
3.含有大量蛋白質(zhì)、細(xì)胞壁或其他鹽的粗產(chǎn)物可能部分抑制酶活性。在這種情況下,有必要增加酶的劑量。
4.酶活性≥250U/ul。對(duì)于小體積制劑,在將酶加入系統(tǒng)之前,可以將其在稀釋緩沖液(20mM Tris-Cl pH 8.0,2mM MgCl2,2mM NaCl)中稀釋至一定濃度。稀釋后的溶液只能在4C下儲(chǔ)存幾天。
5.產(chǎn)物以液體形式提供,并且可以直接加入裂解緩沖液中以供共同使用。
6.為了您的安全和健康,請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)過程中穿戴實(shí)驗(yàn)服、一次性手套和口罩。
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。