Hypoxyprobe?-1太平洋藍(lán)試劑盒組件的詳細(xì)描述

Hypoxyprobe?-1是一種取代的2-硝基咪唑，其化學(xué)名稱為匹莫尼達(dá)唑鹽酸鹽，分子量為290.8；水溶性為400毫摩爾（116毫克/毫升）；在324納米處的紫外吸收（在0.9%生理鹽水中的消光系數(shù)為7020）。其游離堿基，匹莫尼達(dá)唑，分子量為254.3，pKa值為8.7，辛醇水分配系數(shù)為8.5。有關(guān)Hypoxyprobe?-1的作用機(jī)制、常見問題解答（FAQ）和應(yīng)用，固體Hypoxyprobe?-1在室溫下避光存放兩年，并且在4攝氏度的0.9%生理鹽水（100克/升）中存放4.5年，未檢測到降解（UV和HPLC分析）。 匹莫尼達(dá)唑在缺氧細(xì)胞中被還原激活，并與蛋白質(zhì)、肽和氨基酸中的硫醇（巰基）基團(tuán)形成穩(wěn)定的加合物。太平洋藍(lán)染料-MAb1與這些加合物結(jié)合，允許通過免疫化學(xué)方法檢測它們。

太平洋藍(lán)染料-MAb1是一種染料偶聯(lián)的大鼠IgG1單克隆抗體（MAb克隆4.3.11.3），在含有1%牛血清白蛋白和0.09%疊氮鈉的PBS中，以0.5毫克/毫升的濃度供應(yīng)作為穩(wěn)定劑。感興趣的組織可以通過冷凍固定切片或甲醛固定的石蠟包埋切片的免疫組織化學(xué)研究，或者在組織解離后的流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行研究。 注意：太平洋藍(lán)染料-MAb1與匹莫尼達(dá)唑的蛋白質(zhì)、肽和氨基酸加合物結(jié)合，但在免疫組織化學(xué)處理過程中，肽和氨基酸加合物被沖洗掉，因此免疫組織化學(xué)缺氧檢測依賴于缺氧組織中匹莫尼達(dá)唑的蛋白質(zhì)加合物。

作為Hypoxyprobe在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Hypoxyprobe熱銷產(chǎn)品【缺氧探針】太平洋藍(lán)試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

【缺氧探針】太平洋藍(lán)試劑盒：

應(yīng)用：用于檢測細(xì)胞和組織缺氧的免疫化學(xué)方法，包括免疫熒光、免疫過氧化物酶或流式細(xì)胞術(shù)。這種Hypoxyprobe?-1太平洋藍(lán)試劑盒在甲醛固定的石蠟包埋的大鼠腫瘤組織中提供了強(qiáng)烈的免疫染色和非常低的背景。

數(shù)量：a. Hypoxyprobe?-1太平洋藍(lán)試劑盒包含100毫克、200毫克或1000毫克的Hypoxyprobe?-1（匹莫尼達(dá)唑鹽酸鹽）。通常，動(dòng)物研究中使用的劑量為每公斤體重60毫克。

b. 一個(gè)瓶（100毫克和200毫克試劑盒）或兩個(gè)瓶（1000毫克試劑盒），含有200微升的稀釋的太平洋藍(lán)染料偶聯(lián)的IgG1大鼠單克隆抗匹莫尼達(dá)唑抗體（克隆11.23.22.R）。每個(gè)瓶含有200微升的0.50毫克/毫升的太平洋藍(lán)染料-MAb1溶液，該溶液在含有1%牛血清白蛋白和0.09%疊氮鈉的PBS中。太平洋藍(lán)染料-MAb1的最佳稀釋度應(yīng)由研究者確定，但發(fā)現(xiàn)1:50-100稀釋度在大鼠腫瘤組織中能給出強(qiáng)烈的免疫熒光染色。特別為免疫熒光設(shè)計(jì)，太平洋藍(lán)染料-MAb1可以在熒光顯微鏡下或在流式細(xì)胞術(shù)和Western印跡應(yīng)用中被可視化。通常免疫熒光的抗體稀釋度比免疫過氧化物酶檢測系統(tǒng)中使用的要低。

不提供：用于免疫組織化學(xué)分析的標(biāo)準(zhǔn)試劑。

儲存：a. 將Hypoxyprobe?-1固體存放在室溫下避光處。（也可以存放在2-8攝氏度的暗處）。

b. 將太平洋藍(lán)染料-MAb存放在2-8攝氏度的暗處。不要冷凍。

檢測說明

對正?；蚰[瘤組織缺氧的研究始于靜脈輸注、腹腔注射或口服Hypoxyprobe?-1（匹莫尼達(dá)唑鹽酸鹽）溶液，劑量為每公斤體重60毫克。對于一只25克的大鼠，這相當(dāng)于每只大鼠1.5毫克。在小鼠中使用高達(dá)400毫克/公斤的劑量，未觀察到毒性或組織缺氧的變化，但60毫克/公斤可以在低成本下獲得良好的免疫染色。 Hypoxyprobe?-1在生理鹽水中的溶解度為116毫克/毫升，因此可以使用非常小的體積來施用Hypoxyprobe?-1。注射或攝取后，Hypoxyprobe?-1分布到所有組織，包括大腦，但它只與那些氧濃度低于14微摩爾的細(xì)胞中的含硫蛋白質(zhì)形成加合物——相當(dāng)于在37攝氏度下的部分壓力pO2 = 10毫米汞柱。除了腫瘤，正常的組織如肝臟、腎臟和皮膚也包含在pO2 = 10毫米汞柱或以下的細(xì)胞。這些正常組織結(jié)合Hypoxyprobe?-1。小鼠中Hypoxyprobe?-1的血漿半衰期大約為25分鐘。相比之下，大鼠的血漿半衰期為45分鐘，狗為90分鐘，人類為300分鐘。感興趣的大鼠組織可以在施用Hypoxyprobe?-1后60分鐘或更長時(shí)間收獲。在收獲時(shí)組織中的Hypoxyprobe?-1將在組織缺氧時(shí)被結(jié)合，但與組織在60分鐘或更長時(shí)間實(shí)驗(yàn)中暴露的量相比，殘留的Hypoxyprobe?-1的量非常小，因此由于殘留的Hypoxyprobe?-1引起的任何非特異性結(jié)合是不可檢測的。 除了動(dòng)物研究，Hypoxyprobe?試劑盒也可用于組織培養(yǎng)中的細(xì)胞。通常，細(xì)胞懸浮液在缺氧條件下與100到200微摩爾的Hypoxyprobe?-1一起孵化1到2小時(shí)。細(xì)胞通過細(xì)胞旋轉(zhuǎn)收獲，固定并用太平洋藍(lán)MAb-1免疫染色。

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