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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>恒溫?zé)晒夥?/a>>>腸出血性大腸桿菌O104PCR檢測(cè)試劑盒

腸出血性大腸桿菌O104PCR檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-12 19:46:19瀏覽次數(shù):186

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 48T
貨號(hào) FS-02R6334 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
腸出血性大腸桿菌O104PCR檢測(cè)試劑盒的銷售產(chǎn)品:蘋果酸脫氫酶(MDH)測(cè)試盒(測(cè)血清)規(guī)格:50管/48樣檢測(cè)方法:紫外比色法
蘋果酸脫氫酶(MDH)測(cè)試盒(測(cè)組織)規(guī)格:50管/48樣檢測(cè)方法:紫外比色法
琥珀酸脫氫酶(SDH)測(cè)試盒規(guī)格:50管/48樣檢測(cè)方法:比色法

詳細(xì)介紹

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱:腸出血性大腸桿菌O104PCR檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào):FS-02R6334

產(chǎn)品規(guī)格:48T

產(chǎn)品分類:恒溫?zé)晒夥?/span>

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
9.jpg

 

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

 

注意事項(xiàng)

1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。

3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。

6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。

8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

TSGF ELISA Kit 大鼠特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子Multi-class antibodies: 48T

 TSARG4 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GHDC GHDC蛋白抗體  0.2ml

TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA KIT 小鼠特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子 96T

NDRG4 抑癌基因NDRG4抗體 0.2ml

ATPase Na+/ K+ beta 2 鈉鉀ATP通道蛋白抗體 0.1ml

 TSARG4 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

DR-70TM(Human tumor marker DR-70 for lung cancer) ELISA Kit 人肺癌標(biāo)志物DR-70Multi-class antibodies: 48T

 membrane glycoprotein E(VZV) 人痘帶狀皰疹病毒gE蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MGAT5 糖蛋白GNTVA抗體  0.2ml

sAC(Human Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit 人可溶性腺苷環(huán)化 96T

RNF160 環(huán)指蛋白160抗體 0.1ml

C5orf35 5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框35抗體 0.2ml

 membrane glycoprotein E(VZV) 人痘帶狀皰疹病毒gE蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  Bovine IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml

GFI1 自主生長(zhǎng)因子GFI1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ACTBL1/Ovary 卵巢、胎盤、前列腺、蛋白22抗體  0.2ml

 MCP-2/CCL8/FITC 熒光標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(人)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Bov IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗IgG  0.1ml

 rInsulin monoclonal (pig)/FITC 熒光標(biāo)記小鼠抗胰島單克隆抗體(豬)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
腸出血性大腸桿菌O104PCR檢測(cè)試劑盒通用型南芥菜花葉病毒(Arabis Mosaic Virus;ArMV)20次豬Ⅰ型前膠原羧基端肽elisa檢測(cè)試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒豬腎上腺elisa檢測(cè)試劑盒

通用型甜菜壞死黃脈病毒(Beet Necrotic Yellow Vein Virus; BNYVV)基因檢測(cè)試劑盒20次豬生長(zhǎng)釋放多肽elisa檢測(cè)試劑盒價(jià)格

通用型越橘葉枯黃病毒(Blueberry Leaf Scorch Virus;BLSV)20次豬熱休克蛋白70elisa檢測(cè)試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒豬白介2elisa檢測(cè)試劑盒

通用型黃瓜花葉病毒(Cucumber Mosaic Virus;CMV)20次豬促卵泡elisa檢測(cè)試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa檢測(cè)試劑盒

通用型葡萄扇葉病毒(Grapevine Fanleaf Virus;GFLV)20次豬熱休克蛋白90elisa檢測(cè)試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒兔子白介2elisa檢測(cè)試劑盒

通用型鳳仙花壞死斑病毒(Impatiens Necrotic Spot Virus;INSV)20次兔子組織因子elisa檢測(cè)試劑盒價(jià)格

基因檢測(cè)試劑盒兔抗糖蛋白抗體elisa檢測(cè)試劑盒

通用型萵苣(包心)花葉病毒(Lettuce Mosaic Virus;LMV)20次豬雌二醇受體elisa檢測(cè)試劑盒價(jià)格

基因檢測(cè)試劑盒兔子腫瘤壞死因子αelisa檢測(cè)試劑盒

通用型辣椒輕斑駁病毒(Pepper Mild Mottle Virus;PMMV)20次兔血清總補(bǔ)體elisa檢測(cè)試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒兔環(huán)磷腺苷elisa檢測(cè)試劑盒價(jià)格

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

 


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