詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-02R6336
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品分類:恒溫熒光法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
NE ELISA Kit 大鼠中性粒細胞彈性蛋白Multi-class antibodies: 48T
TSARG3 生精細胞凋亡相關基因3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GHR 生長受體抗體 0.1ml
Hyp(Mouse hydroxyproline) ELISA KIT 小鼠羥脯 96T
NKG2A NK細胞受體2A抗體 0.2ml
AGXT2L2 AGXT2L2蛋白抗體 0.2ml
TSARG3 生精細胞凋亡相關基因3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
MMP-7 人血清金屬基質蛋白-7Multi-class antibodies: 48T
CYP19 細胞色P450 19抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NF66/alpha Internexin α-中連蛋白抗體 0.2ml
Human Protein Carbonyl,PC ELISA Kit 人羰基化蛋白 96T
RNF16 環(huán)指蛋白16抗體 0.2ml
CEP57 特異性蛋白57抗體 0.1ml
CYP19 細胞色P450 19抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Bovine IgM/APC APC標記的兔抗IgM 0.1ml
GGA1 γ-銜接蛋白相關蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACTH (18-39) 促腎上腺皮質ACTH(18-39)抗體 0.1ml
MCP-1/FITC 熒光標記巨噬細胞趨化蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/Bio 生物標記的兔抗IgG 0.1ml
rInsulin /FITC 熒光標記抗重抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒通用型番茄斑萎病毒(Tomato Spotted Wilt Virus;TSWV)20次豬白介1βelisa檢測試劑盒價格
基因檢測試劑盒豬肝生長因子elisa檢測試劑盒
通用型總番茄斑萎病毒(Total Tospo Virus;TOSPO)基因檢測試劑盒20次豬睪酮elisa檢測試劑盒價格
通用型南瓜黃化花葉病毒(Zucchini Yellow Mosaic Virus;ZYMV)20次豬組織因子elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒豬白介18elisa檢測試劑盒
通用型瓜類性果斑?。ㄎ鞴瞎撸?/span>Acidovorax avenae subsp. citrulli;Watermelon Fruit Blotch)基因檢測試劑盒20次兔子間粘附分子3elisa檢測試劑盒
通用型胡蘿卜性葉斑?。?/span>Xanthomonas campestris pv. Carotae;Xccar)基因檢測試劑盒20次兔子組織多肽抗原elisa檢測試劑盒
通用型野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris pv. Pelargonii;Xcp)20次豬食欲/阿立新Belisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒豬血清一氧化氮elisa檢測試劑盒
通用型加拿大低菜籽油黑脛病/油菜腐爛病/甘藍黑莖病菌(Blackleg of Canola/Leptosphaeria maculans/Phoma lingam)基因檢測試劑盒20次兔補體蛋白3elisa檢測試劑盒
通用型疫病菌種(Phytophthora species)基因檢測試劑盒20次兔熱休克蛋白20elisa檢測試劑盒
通用型絲核菌種(Rhizoctonia species)基因檢測試劑盒20次豬食欲受體elisa檢測試劑盒價格
通用型腐霉屬種(Pythium species)基因檢測試劑盒20次豬低分子肝elisa檢測試劑盒
通用型灰斑病灰梨孢菌(Grey Leaf Spot Pyricularia grisea)20次兔白介17elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒兔糖化血紅蛋白A1celisa檢測試劑盒