詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.1PCR管 | FS-02R6413 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
IL-3 大鼠白介-3Multi-class antibodies: 48T
TNFRSF12A 壞死因子配體超家族成員12A抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NEK2 中心體相關(guān)蛋白激Nek2抗體 0.2ml
Human glycosylated serum protein,GSP ELISA Kit 人糖化蛋白 96T
TMEM59L 跨膜蛋白59樣蛋白抗體 0.2ml
C7orf25 7號染色體開放閱讀框25抗體 0.2ml
TNFRSF12A 壞死因子配體超家族成員12A抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin) ELISA Kit 人癌胚鐵蛋白Multi-class antibodies: 48T
HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MFSD12/C19orf28 19號染色體開放閱讀框28抗體 0.2ml
ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人花生四烯5脂加氧 96T
RFPL2+RFPL3 RET指蛋白樣2/3抗體 0.2ml
C5orf24 5號染色體開放閱讀框24抗體 0.2ml
HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Goat IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
GOLGA6L4 高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 0.1ml
LH/Biotin 生物標(biāo)記抗人促黃體生成抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
STAT5/FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
狗源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管豬鈣聯(lián)蛋白(CNX)elisa檢測試劑盒
豬主要穹窿蛋白(MVP)elisa檢測試劑盒
豬戊糖(PTD)elisa檢測試劑盒
豬纖維介蛋白(FGL2)elisa檢測試劑盒
豬跨膜絲蛋白2(TMPRSS2)elisa檢測試劑盒
豬二肽基肽X (DPP10)elisa檢測試劑盒
豬BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)elisa檢測試劑盒
豬谷脫羧(GAD)elisa檢測試劑盒
豬集落因子2受體α (CSF2Rα)elisa檢測試劑盒
豬轉(zhuǎn)錄活因子7(ATF7)elisa檢測試劑盒
豬活化蛋白C(APC)elisa檢測試劑盒
豬角化因子(KAF)elisa檢測試劑盒
豬GTP活化蛋白(GAP)elisa檢測試劑盒
豬載脂蛋白B(ApoB)elisa檢測試劑盒
豬角蛋白17(CK17/KRT17)elisa檢測試劑盒