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詳細介紹
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數規(guī)格：
產品名稱：熒光假單胞菌PCR檢測試劑盒
產品貨號：FS-02R6475
產品規(guī)格：48T
產品分類：水產養(yǎng)殖病害檢測系列（恒溫熒光法）
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Myosin Phosphatase/FITC 熒光標記肌球蛋白磷抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TREML2/TLT2/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體樣轉錄因子2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCG2/CD338 三磷腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體 0.1ml
Mouse Guinea pig IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GNAI3 抑制型G蛋白α3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體 0.2ml
TREML2/TLT2/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體樣轉錄因子2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4) ELISA Kit 人胰島樣生長因子結合蛋白4Multi-class antibodies： 48T
GRIM19 干擾/維甲誘導凋亡相關基因抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MOBP 少突膠質細胞髓鞘相關蛋白抗體 0.2ml
RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗類風濕關節(jié)炎核抗原 96T
RND3 Rho家族GTP3抗體 0.1ml
Cortactin 皮層肌動蛋白抗體 0.2ml
GRIM19 干擾/維甲誘導凋亡相關基因抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit chicken IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgM 0.1ml
GPX3 谷胱甘肽過氧化3 0.1ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS13 整合樣金屬蛋白與13型抗體 0.2ml
MARCKS /FITC 熒光標記丙蛋白激C底物Marcks抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗IgM 0.1ml
Tetracycline/FITC 熒光標記四環(huán)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
熒光假單胞菌PCR檢測試劑盒通用型鮑氏志賀菌Shigella boydii基因檢測試劑盒20次小鼠凋亡相關因子elisa檢測試劑盒
通用型小腸結腸炎耶爾森氏菌（Yersinia enterocolitica）基因20次小鼠基質金屬蛋白13elisa檢測試劑盒
檢測試劑盒小鼠血小板因子4elisa檢測試劑盒
通用型沙門氏菌（Salmonellae）基因檢測試劑盒20次大鼠血管緊張原elisa檢測試劑盒
通用型鼠傷寒沙門菌Salmonella typhimurium基因檢測試劑盒20次小鼠抑瘤Melisa檢測試劑盒
通用型空腸彎曲菌（Campylobacter jejuni）基因檢測試劑盒20次小鼠基質金屬蛋白5elisa檢測試劑盒
通用型大腸彎曲桿菌（Campylobacter coli）基因檢測試劑盒20次小鼠干因子受體elisa檢測試劑盒
通用型海鳥彎曲桿菌（Campylobacter laridis）基因檢測試劑盒20次大鼠抗肌內膜抗體IgAelisa檢測試劑盒
通用型產氣莢膜梭茵（Clostridium perfringens）基因檢測試劑盒20次大鼠黑色抗體elisa檢測試劑盒
通用型艱難梭菌（Clostridium difficile）基因檢測試劑盒20次大鼠通道蛋白5elisa檢測試劑盒
通用型艾里塔拉軍團菌（Legionella erythra）基因檢測試劑盒20次大鼠酯轉移蛋白elisa檢測試劑盒
通用型嗜肺軍團菌（Legionella pneumophilia）基因檢測試劑盒20次小鼠白介7elisa檢測試劑盒
通用型大腸桿菌（Escherichia coli）基因檢測試劑盒20次小鼠白介10elisa檢測試劑盒
通用型vero大腸桿菌志賀氏-1（VTEC - Shigatoxin 1）20次小鼠神經生長因子elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠羥脯elisa檢測試劑盒
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