化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬源性成分PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-02R6377
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品分類：恒溫?zé)晒夥?/span>
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細(xì)胞瘤因子2Multi-class antibodies： 48T
TRPM2 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ghrelin/Obestatin 腦腸肽抗體 0.1ml
ADAM8 ELISA Kit 大鼠解整合樣金屬蛋白8 96T
NGB 腦紅蛋白/神紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體 0.1ml
ANKS6 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml
TRPM2 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)Multi-class antibodies： 0.2ml
CYFRA21-1(Human cytokeratin fragment antigen 21-1) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白21-1片段Multi-class antibodies： 48T
Phospho-HER3 (Tyr1222) 磷化HER3受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MIA2 黑色瘤抑制活性蛋白2抗體 0.2ml
uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人尿激型纖溶原激活物 96T
RNF149 環(huán)指蛋白149抗體 0.2ml
CEP72 中心體蛋白72抗體 0.1ml
Phospho-HER3 (Tyr1222) 磷化HER3受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Bovine IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
phospho-GATA3 (Ser115) 磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ACTRIC/Activin A Receptor Type IC 激活受體1C抗體 0.2ml
Mcl-1/FITC 熒光標(biāo)記髓樣細(xì)胞白血病-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗IgG 0.5ml
RALDH2/FITC 熒光標(biāo)記視黃脫氫2型抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
豬源性成分PCR檢測(cè)試劑盒細(xì)胞培養(yǎng)基D-葡萄糖法檢測(cè)試劑盒20次犬血栓B2elisa檢測(cè)試劑盒
果菜D-葡萄糖氧化法檢測(cè)試劑盒20次猴γ干擾elisa檢測(cè)試劑盒
乳品D-葡萄糖氧化法檢測(cè)試劑盒20次猴載脂蛋白A1elisa檢測(cè)試劑盒
食物D-葡萄糖氧化法檢測(cè)試劑盒20次兔子孕/孕酮elisa檢測(cè)試劑盒
糖果D-葡萄糖氧化法檢測(cè)試劑盒20次兔子可溶性粘附分子elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)基D-葡萄糖氧化法檢測(cè)試劑盒20次兔子白介10elisa檢測(cè)試劑盒
葡萄糖待測(cè)樣品處理試劑盒20次兔子皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒
糖類乳糖含量連續(xù)反應(yīng)光譜法檢測(cè)試劑盒20次犬雌elisa檢測(cè)試劑盒
乳制品乳糖含量連續(xù)反應(yīng)光譜法檢測(cè)試劑盒20次山羊白介4elisa檢測(cè)試劑盒
食物乳糖含量連續(xù)反應(yīng)光譜法檢測(cè)試劑盒20次犬主要組織相容性復(fù)合體elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)基乳糖含量連續(xù)反應(yīng)光譜法檢測(cè)試劑盒20次犬肌鈣蛋白Ⅰelisa檢測(cè)試劑盒
血液乳糖含量連續(xù)反應(yīng)光譜法檢測(cè)試劑盒20次猴抗肝膜抗體elisa檢測(cè)試劑盒
體液乳糖含量連續(xù)反應(yīng)光譜法檢測(cè)試劑盒20次內(nèi)皮1elisa檢測(cè)試劑盒
乳糖待測(cè)樣品處理試劑盒20次兔子S100B蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
糖類D-半乳糖含量光譜法檢測(cè)試劑盒20次兔子白介4elisa檢測(cè)試劑盒
化工儀器網(wǎng)