轉基因品系玉米T25探針法qPCR試劑盒注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉基因品系玉米T25探針法qPCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
服務流程：
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針（染料法只需設計引物）
2、抽提DNA、RNA，并對RNA進行逆轉錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
動物細胞/組織莽草酸脫氫酶（shikimate dehydrogenase；SkDH）電泳分析　TUFT1 　20 ul

植物莽草酸脫氫酶（shikimate dehydrogenase；SkDH）電泳分析　UBA5 　100 ug

血紅蛋白分型　BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) 　100 ul

二（DPA）DNA比色定量測定　UBA6 　1 Kit

二氨基甲酸（DABA）DNA比色定量測定　UBAC2 　100 ul

通用型糖類總量鐵化物比色法定量　UBASH3A 　100 ul

細胞糖類總量鐵化物比色法定量　TXNDC5(Thioredoxin domain-containing protein 5) 　20 ul

組織糖類總量鐵化物比色法定量　UBAP1 　100 ul

血液糖類總量鐵化物比色法定量　TXNDC4 　20 ul

體液糖類總量鐵化物比色法定量　UBC 　100 ul

植物糖類總量鐵化物比色法定量　TTLL10 　500 ul

糖類總量硫酸-酚比色法定量　TWF1 　100 ul

糖類總量氨基硫酚熒光定量　TUSC5 　100 ul

細菌多聚糖PURPALD比色法定量　TTRAP 　100 ul

PH0-2顯色（BRILLIANT GREEN）指示溶液　TWIST1(Twist-related protein 1) 　100 ul

PH2-3顯色（CRESOL RED）指示溶液　TUB 　100 ul
轉基因品系玉米T25探針法qPCR試劑盒Trichoderma│viride分離基物: 豬糞提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 分解纖維素培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

Chryseobacterium│gleum分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 35℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；礦物油法

Streptomyces│hygroscopicus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 微生物代謝調控研究培養(yǎng)基: 39生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Alcanivorax│diesolei分離基物: 沉積物/土黃色沉積物上覆提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 有機污染物降解菌/石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 腹瀉仔豬提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 科研及血清定型培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;

Flavobacterium│hydatis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 848生長條件: 20℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Arthrobacter│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 444生長條件: 4℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Aspergillus│niger提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 35℃存儲條件: 礦物油法

Geobacillus│sp.分離基物: 砂土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 859生長條件: 70℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。